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详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
产品属性：
中文名称：细胞核提取试剂盒
英文名称：Nuclear Extraction Kit
产品规格：50T|100T
发货周期：1～3天
商品介绍：
细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，性能稳定。 操作步骤： 1. 样本处理 a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL预冷的Lysis Buffer，再加入50μL Reagent A，0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织，可用双层纱布过滤。 b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 g 离心5~10 min收集细胞，计数。每次提取需要5 ×107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，再加入50μL Reagent A，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨细胞20~30次。 2. 将组织或细胞匀浆物转移到1.5mL离心管中，4℃，700g 离心5 min。细胞核沉淀在收集管底部，弃上清。加入0.5 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬沉淀。 3. 取另一新离心管内加入0.5 mL Medium Buffer，吸取上一步的重悬液，沿管壁小心地加入到此离心管中，置于Medium Buffer之上，4℃，700 g 离心5min。细胞核沉淀在管底。 4. 弃上清，在细胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重悬细胞核沉淀，1000g 离心10min ，弃上清，得到较纯的细胞核沉淀。 5. 用50-100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀，立即使用或-70℃保存。 储存条件：4℃ |
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
Corin蛋白(CRN)英文名称：CRN ELISA KitCD80抗体包装250mg
Cerberus蛋白(CER)英文名称：CER ELISA KitCD19抗体包装1g
CD83分子(CD83)英文名称：CD83 ELISA KitC-C元件趋化因子26抗体包装250mg
CD5抗原样蛋白(CD5L)英文名称：CD5L ELISA Kit5号染色体开放阅读框22抗体包装25g
CD40配体(CD40L)英文名称：CD40L ELISA Kit钙激活离子通道4蛋白抗体包装5g
CD3d分子(CD3d)英文名称：CD3d ELISA Kit嗜粒趋化蛋白3抗体包装1g
CD320分子(CD320)英文名称：CD320 ELISA Kit嗜粒趋化蛋白3抗体包装250mg
CD30配体(CD30L)英文名称：CD30L ELISA Kit趋化抗体包装25g
CD163分子(CD163)英文名称：CD163 ELISA Kit5号染色体开放阅读框55抗体包装5g
CD14分子(CD14)英文名称：CD14 ELISA Kit表面趋化因子受体7抗体包装1g
CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)英文名称：CEBPβ ELISA Kit色c氧化7A2抗体包装5g
C4结合蛋白α(C4BPα)英文名称：C4BPα ELISA KitCD36抗体包装100g
B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)英文名称：Bcl2 ELISA Kit固合成CYP11B2抗体包装25g
B-细胞激活因子受体(BAFFR)英文名称：BAFFR ELISA Kit7号染色体开放阅读框16抗体包装5g
B-细胞激活因子(BAFF)英文名称：BAFF ELISA Kit10号染色体开放阅读框62抗体包装1g
: IFFI2377资源名称: 黑曲霉 质量规格：HPLC>98%,标准品乙酰肝试剂盒银锻苷;Tiliroside
淡紫拟青霉Paecilomyces│lilacinus (Thom) Samson 质量规格：纯度>99%,AR乙酰羧化合成试剂盒印;Indaconitone
IMRUR1547资源名称: 披发糖多孢菌 质量规格：HPLC>98%,标准品乙酰酯试剂盒盐黄柏碱;Phellodendrine
细胞核提取试剂盒香菇 7-溴-2,4(1H,3H)-喹唑啉二酮并殖吸虫Elisa
美人鱼发光杆美人鱼亚种 (E)-3-(叔丁基二甲基硅氧基)烯-1-基-酸频哪酯鞭毛虫Elisa
仁果丛梗孢 N-CBZ-甘氨酸乙酯布鲁东氏酪氨酸激Elisa
醋化醋杆 3-Boc-6-氧杂-3-氮杂二环[3.1.0]己烷Wnt-3a蛋白Elisa
尖孢 2,3,6-三氟苯基乙酸低氧诱导因子Elisa
格尔木马赛 伊班磷酸甘肽Elisa
嗜热链球 苯并[b]噻吩并-3-基酸鼠基因相关蛋白Elisa
假单胞 3,5-二甲基-吡唑-4-羧酸转化蛋白RhoA-GTPElisa
绿粘帚霉 Boc-D-精氨酸盐酸盐谷氨酸氧化Elisa
平滑白蛋巢 (1S,4S)-2-Boc-2,5-二氮双环[2.2.1]庚烷谷氨酸氧化Elisa
冬菇属 1-苯基-1H-吡唑-4-羧酸β位淀粉样前体蛋白裂解1Elisa
节杆 2-氨基-4-苯基酮戊二酸Elisa
灰色链霉灰色亚种 B-(6,9-二苯基-9H-咔唑-3-基)酸EB病抗体Elisa
洋葱伯克霍尔德 3-(二甲氨基)-2-异基烯酸甲酯α淀粉Elisa
胶孢 2-(2-氯-5-苯甲基)-5-(6-氟吡啶-3-基)噻吩胆囊收缩;缩胆囊八肽Elisa
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