化工仪器网
产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 10T|20T|50T|100T |
|---|---|---|---|
| 货号 | GOY-01X9562 | 应用领域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司产品仅供科研 | 英文名称 | Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit |
BIRC5/Survivin variant 凋亡抑制因子5抗体2-丁酮 97%
BK channel BK通道蛋白抗体亚油 99%
BKCa channels 钙激活通道蛋白抗体1,2,3,4,5,6
BIRC5/Survivin variant 凋亡抑制因子5抗体2-丁酮 97%
BK channel BK通道蛋白抗体亚油 99%
BKCa channels 钙激活通道蛋白抗体1,2,3,4,5,6
详细介绍
商品介绍：
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素PE 标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 7-AAD（7-amino-actinomycin D）是一种核酸染料，它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD 的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA 的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD 标记DNA 的强弱，将细胞分为三群：7-AAD 强为死亡细胞，7-AAD 弱是凋亡细胞，7-AAD-为正?；盍ο赴?。7-AAD 同PI 有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI 窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI 的佳替代品，可与Annexin V-PE 联合使用。 本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit | 10T|20T|50T|100T | 1～3天 |
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
基质金属蛋白3(MMP-3)英文名称：MMP-3 ELISA Kit丁?；铣?抗体包装5g
基质金属蛋白2/明胶A(MMP-2/Gelatinase A)英文名称：MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit脂肪源性亮基肽抗体（血管内皮生长因子诱导蛋白）包装1g
基质金属蛋白13(MMP-13)英文名称：MMP-13 ELISA Kit线粒体凋亡诱导因子2抗体包装250mg
基质金属蛋白10(MMP-10)英文名称：MMP-10 ELISA KitABL2蛋白抗体包装1g
基质金属蛋白1(MMP-1)英文名称：MMP-1 ELISA Kit血管紧张转换ACE1抗体包装5g
基质γ羧基谷蛋白(MGP)英文名称：MGP ELISA Kit血管紧张转换2抗体包装100ml
肌激同工MM(CK-MM)英文名称：CK-MM ELISA KitAcinus抗体包装25ml
肌激同工MB(CK-MB)英文名称：CK-MB ELISA Kit醋激1抗体包装100ml
肌激(CK)英文名称：CK ELISA Kit促肾上腺皮质激(1-39)抗体包装25ml
肌生成抑制(MSTN)英文名称：MSTN ELISA Kit促肾上腺皮质激ACTH(18-39)抗体包装1g
肌球蛋白重链(MHC)英文名称：MHC ELISA Kit促肾上腺皮质激ACTH (7-23)抗体包装25g
肌球蛋白(MYS)英文名称：MYS ELISA Kit活性依赖的神经?；る目固灏?00g
肌红蛋白(MYO/MB)英文名称：MYO/MB ELISA Kitα1性糖蛋白1/类粘蛋白1抗体包装25g
肌酐(Cr)英文名称：Cr ELISA Kitα1性糖蛋白2抗体（类粘蛋白2）包装1g
肌钙蛋白T(Tn-T)英文名称：Tn-T ELISA Kit磷化通道蛋白2抗体包装25g
盐转运三磷腺苷抗体血红结合蛋白(HPX)Tofacitinib (CP-690550,Tasocitinib) is a novel inhibitor of JAK3 with IC50 of 1
Annexin V-PE/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒阴沟肠杆（阴沟肠杆阴沟亚种） (6-苄基-6H-吡咯[3,4-B]吡啶-5,7-二酮)富含半胱氨酸型酸性蛋白检测试剂盒
粪肠球 乙虫富亮氨酸α2糖蛋白1检测试剂盒
大丽花轮枝孢（棉花黄萎?。?/span> 5-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯钙泵检测试剂盒
肺炎克雷伯 4-羟基吖啶钙离子通道抗体检测试剂盒
大肠埃希氏杆 5-氯-3-硝基-2-基吡啶钙调素；钙调蛋白检测试剂盒
黑腐皮壳 6-溴喹啉-2-酮钙调素依赖性蛋白激酶2检测试剂盒
河北木霉 2-(2-氯乙酰氨基)-5-硝基-2'-氯二苯甲酮钙网蛋白检测试剂盒
滑假丝酵母 2-溴-4-甲基-6-氟吡啶钙卫蛋白检测试剂盒
香蕉 6-氨基-5-溴烟酸甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测试剂盒
灵芝(红芝, 赤芝) 2-(1H-吡唑-4-基)乙甘酸-N-甲基转移酶检测试剂盒
泰塔温沙壤土杆 4-甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶-2检测试剂盒
中慢生华癸根瘤 1-(4-三氟甲基嘧啶-2-基)哌甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶检测试剂盒
肉梭 素C型 6-甲氧基-7-苄氧基喹唑啉-4-酮甘露糖结合蛋白;甘露糖结合凝集素检测试剂盒
炭黑曲霉 3-叔丁氧?；踊犯楦事短鞘芴寮觳馐约梁?/span>
芽胞杆 4-乙氧基-3-硝基吡啶甘油-3-磷酸脱氢酶检测试剂盒
化工仪器网