详细介绍
商品介绍:
用途: 软骨染色 注意事项: 主要由固绿染色液和番红O染色液组成。染色时,注意分化时间,否则容易导致过染或脱色 储存条件:室温,避光,12个月 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
5×50ml|5×100ml | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷英文名称: Ponceau 2RA型流感病H3N2-M2蛋白抗体包装1g
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名称: Rose bengalHSH2D抗体包装250mg
6,7,4'-三羟基异黄英文名称: Azophloxine蛭抗体包装25g
6-氧基二氢血根碱英文名称: Eosin Y ,alcohol solution白抗原A抗体包装5g
6-氧基山柰酚-3-O-芸香糖苷英文名称: Eosin B人瘤病16型E7抗体包装1g
6-姜酚(姜辣)英文名称: Fast Garnet GBC Salt人类状瘤病58 E6蛋白抗体包装5g
6-姜烯酚(标准品)英文名称: Fast Red 3 GL Salt人类状瘤病16抗体包装100g
6-羟基(标准品)英文名称: Fast Red KL Salt人类状瘤病18 E7抗体包装25g
6-基异麦冬黄烷A(标准品)英文名称: Fast Red B Salt人类状瘤病31 E7抗体包装5g
7,4'-二羟基黄(标准品)英文名称: Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt转录因子HES2抗体包装1g
7,8-二氢生物蝶呤英文名称: Ponceau S转录因子HES3抗体包装5g
7-O-基芦荟新甙A(标准品)英文名称: Ciprofibrate多磷肌激IPMK抗体包装1g
7-O-基芒果苷(标准品)英文名称: Eosin Y water solutionIKK复合物相关蛋白抗体包装5g
7-O-乙基莫诺苷英文名称: Azocarmine BIQSEC2抗体包装100g
7-表紫杉(标准品)英文名称: Azocarmine G交叉蛋白2抗体包装25g
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,BR淋巴趋化因子试剂盒基黄连碱;Worenine chlor
苍白弯孢Curvularia│pallescens 质量规格:>98%,反式,BR淋巴抗原6复合物基因座A试剂盒吉马;Germacrone
大岛芽孢杆菌Bacillus│oshimensis 质量规格:>99%,BR淋巴功能相关抗原3试剂盒剑麻皂苷元;Tigogenin
改良番红O-固绿软骨染色液粉拟青霉 芴甲氧羰?;涟彼崂嗾车鞍譋lisa
相思根瘤 硫酸钡亚硫酸还原Elisa
大豆慢生根瘤 1-氯-3-(三氟甲氧基)苯腺苷-5-磷酰硫酸还原Elisa
密旋链霉 3,5-二氯-4-氟三氟甲苯氧乙酰丝氨酸 (硫)裂解Elisa
黄杆 4-苯基ATP硫酸化Elisa
赖氨酸芽胞杆属 FMOC-肌氨酸可溶性淀粉合成Elisa
嗜盐四联球 1-金刚烷甲磷脂CElisa
谷氨酸棒状杆(黄色短杆)* 三氯化钛(III)溶液磷脂DElisa
大肠埃希 章盐酸盐胰高血糖Elisa
福山假丝酵母 溴化锌芜菁花叶病Elisa
鸭疫里氏杆 D-3-(2-萘基)-氨酸甘油三磷酸脱氢Elisa
橙色杆状 4-溴-3-甲酸?;铣蒃lisa
褐球固氮* 2,3,5,6-四氟二酰基甘油?;艵lisa
埃切毕赤酵母 Boc-3-(1-萘基)-D-氨酸马铃薯病XElisa
球孢白僵 3-基-4,6-二甲基-2-羟基吡啶二磷酸腺苷Elisa