详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
2×1ml | 1~3天 |
商品介绍:
用途: 检测细胞自噬 储存条件:-20℃,避光,12个月 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
人参皂苷Rh1(标准品)英文名称: (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol磷化糖皮质激受体抗体包装25g
人参皂苷Rh3(标准品)英文名称: (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 葡萄糖转运蛋白6抗体包装5g
人参皂苷Rh7(标准品)英文名称: N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam糖皮质激受体β抗体包装100g
人参皂苷Rh8(标准品)英文名称: p-Anisic Acid胰岛葡萄糖6磷2抗体包装25g
人参皂苷Rk1(标准品)英文名称: 9-Anthracenecarboxylic Acid葡萄糖氧化抗体包装5g
人参皂苷Rk2(标准品)英文名称: 5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin葡萄糖苷2β/Glucosidase IIβ抗体包装5MG
人参皂苷RK3(标准品)英文名称: 2-Naphthoyl Chloride谷脱氢2抗体包装10MG
人参皂苷Ro(标准品)英文名称: 4-Dimethylaminocinnamaldehyde磷化谷受体1抗体包装1g
人工虎骨(标准品)英文名称: 2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydrideγ-谷酰解抗体包装250mg
人工?;疲ū曜计罚┯⑽拿疲?/span> 2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine谷酰-脯酰-tRNA合成抗体包装100g
忍冬藤(标准品)英文名称: 2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine谷氧还蛋白2抗体包装25g
绒毛龙芽草(标准品)英文名称: 2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine谷氧还蛋白5抗体包装5g
鞣花(标准品)英文名称: α-Thioglycerol 过氧化2抗体包装100g
肉苁蓉(标准品)英文名称: 3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid 过氧化7抗体包装25g
肉苁蓉(管花肉苁蓉)(标准品)英文名称: 4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic AcidS转移α1抗体包装5g
: CGMCC1.458资源名称: 蜡状芽孢杆菌 质量规格:>98%,可用于培养尿激试剂盒雷酚内酯;Triptophenolide
稻麦角菌Claviceps│oryzae-sativae 质量规格:>98.5%尿苷二磷葡萄糖神经酰葡萄糖基转移试剂盒蓝萼;Glaucocalyxin A
节杆菌Arthrobacter│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品尿苷二磷葡萄糖转移2试剂盒芦竹碱;Gramine
MDC染色液米根霉 4-溴丁酰氯周期依赖性激1Elisa
白地霉 3-羟基-5-甲酸盐酸多巴Elisa
黄发链霉 乙基溴化镁膜联蛋白A6Elisa
细枝孢 O-叔丁基-L-叔丁酯人分泌型卷曲相关蛋白5Elisa
耐辐射奇球 5-羧基荧光琥珀酰亚酯凋亡加强结构域蛋白8Elisa
交替红色杆属 3-溴-2-(溴甲基)酸乙酯乙酰化高迁移族蛋白Elisa
柱孢属 3,3-二甲基烯酸甲酯尾肢同源蛋白2Elisa
小棱盘 丁二酸胃生长Elisa
多主葡萄壳 Boc-statineCD69分子Elisa
溶淀粉类芽孢杆 2-庚基苯并咪唑血管加压Elisa
油菜核病 七甲基二硅氮烷簇集蛋白Elisa
乳白耙 3-甲?;?4-羟基组织因子途径抑制物1Elisa
大肠埃希 甲酸-d2细小病B29-IgG抗体Elisa
东方伊萨酵母 异丁基锂细小病B29-IgM抗体Elisa
贝酵母 4,4'-二异酸基-3,3'-二甲基联苯转录中介因子1βElisa