详细介绍
商品介绍:
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。 储存条件:-20℃,有效期12个月 |
产品属性:
中文名称:Hoechst 33258 DNA染料
英文名称:
产品规格:10mg
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
胱天蛋白11(CASP11)英文名称:CASP11 ELISA KitC型凝集结构域家族4成员C抗体包装25mg
胱天蛋白1(CASP1)英文名称:CASP1 ELISA KitCD226抗体包装25g
胱硫醚β合(CβS)英文名称:CβS ELISA KitCD26抗体包装5g
骨形成蛋白8B(BMP8B)英文名称:BMP8B ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ/Fc γ RII a抗体包装5g
骨形成蛋白6(BMP6)英文名称:BMP6 ELISA Kit紧密连接蛋白20抗体包装1g
骨形成蛋白1(BMP1)英文名称:BMP1 ELISA Kit中心体蛋白135抗体包装5g
骨骼肌特异性受体酪激(MUSK)英文名称:MUSK ELISA Kit半胱蛋白蛋白-7抗体包装100g
骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)英文名称:TNNT1 ELISA Kit钙调节抗体(钙调蛋白/钙调)包装10g
骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2)英文名称:TNNI2 ELISA Kit1号染色体开放阅读框181抗体包装25g
骨钙(OC)英文名称:OC ELISA KitⅠ型补体受体抗体(C3b/C4b受体抗体)包装25mg
骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPRⅡ)英文名称:BMPRⅡ ELISA Kit8型胶原/内皮胶原蛋白抗体包装1g
骨成型蛋白受体1A(BMPR1A)英文名称:BMPR1A ELISA Kit结合转化激活因子CITED1抗体包装5g
骨成型蛋白7(BMP7)英文名称:BMP7 ELISA Kit色P450 2C9抗体包装10MG
骨成型蛋白4(BMP4)英文名称:BMP4 ELISA Kit色P450 2D6抗体包装100g
骨成型蛋白2(BMP2)英文名称:BMP2 ELISA Kit血小板活化因子CTR9抗体包装25g
特罗伊察栖砂杆菌Arenibacter│troitsensis 质量规格:效价测定早老2试剂盒乙?;邹悸?Acetyl-trans
长柄链格孢Alternaria│longipes 质量规格:>98%,合物早老1试剂盒羊藿次苷II;Icarisid II
鲍希瓦氏菌Shewanella│haliotis 质量规格:>99%,USP32,BR,可用于培养再生胰岛衍生1α/胰石蛋白/胰线蛋白试剂盒茵芋苷;Skimmin
Hoechst 33258 DNA染料细孢毛霉 亚磷酸二异丁酯4-羟基苯酮酸双加氧Elisa
匍枝根霉(黑根霉) 6-氨基-吡-2-羧酸甲酯COP9结构光形态发生同源物亚基2Elisa
Aureimonas frigidaquae N-(3-氨基基)-N-甲基氨酸叔丁酯盐酸盐COP9结构光形态发生同源物亚基2抗体Elisa
光帽鳞伞(滑菇) S-甲基-L-半胱氨酸CC趋化因子配体1Elisa
茶藨子葡萄座腔 4-溴-3,5-二氯三氟甲苯RIG-IElisa
酿酒酵母 N,N-双(2-氯乙基)氨酸叔丁酯柯萨奇病B3Elisa
橄榄绿链霉 4-(二氟甲氧基)-3-(环氧基)苯甲DNA甲基转移3A2Elisa
白僵 1,1,2,3,3-五氯烷雌受体γElisa
冬菇属 胆固琥珀酸单酯柯萨奇病Elisa
米曲霉 3-(4-溴苄基)-2-丁基-5-氯-4-咪唑甲G_(i;o)蛋白Elisa
耐冷冷杆 Nα,Nε-双(叔丁氧羰基)-L-赖氨酸二环己铵盐蛋白聚糖AElisa
普通链霉 甲氧基去氧肾上腺盐酸盐蛋白聚糖BElisa
香菇 反式-4'-乙基-[1,1'-联环己烷]-4-酮酪氨酸氨基转移Elisa
Paucimonas lemoignei 5-(2-甲氧基苯氧基)-[2,2-二嘧啶]-4,6(1H,5H)-二酮谷氨酸氨基转移Elisa
芽孢杆属 2-(2-甲氧基苯氧基)二酸二甲酯补体蛋白1Elisa