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详细介绍
产品属性：
中文名称：DAPI双链DNA染料
英文名称：DAPI dihydrochloride
产品规格：10mg
发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研
商品介绍：
DAPI，也称DAPI dihydrochloride，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。 CAS：28718-90-3 分子式：C16H17Cl2N5 分子量：350.25 纯度：>90% (from N) 注意事项 1)DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。 2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。 3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。 4)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
核糖核A3(RNASE3)英文名称：RNASE3 ELISA Kit22号染色体开放阅读框15抗体包装1g
核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)英文名称：NR3C1 ELISA Kit22号染色体开放阅读框13抗体包装25g
核仁(NCL)英文名称：NCL ELISA Kit22号染色体开放阅读框26抗体包装5g
核仁磷蛋白(NPM)英文名称：NPM ELISA Kit补体C2b链多肽抗体包装1g
核连蛋白1(NUCB1)英文名称：NUCB1 ELISA Kit2号染色体开放阅读框16抗体包装5g
核苷还原M1(RRM1)英文名称：RRM1 ELISA Kit2号染色体开放阅读框27抗体包装25g
和肽(CPP)英文名称：CPP ELISA Kit磷化δ连环蛋白抗体包装5g
含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)英文名称：vWA3A ELISA Kit磷化δ连环蛋白抗体包装1g
含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)英文名称：vWA1 ELISA Kit磷化δ连环蛋白抗体包装5g
含铜胺氧化3(AOC3)英文名称：AOC3 ELISA Kit磷化δ连环蛋白抗体包装1g
含亮丰富重复蛋白3C(LRRC3C)英文名称：LRRC3C ELISA Kit磷化δ连环蛋白抗体包装5g
含TCP1伴侣蛋白亚基2(CCT2)英文名称：CCT2 ELISA Kit磷化δ连环蛋白抗体包装25g
含STIP1同源物U-框蛋白1(STUB1)英文名称：STUB1 ELISA Kit22号染色体开放阅读框43抗体包装5g
含IQ基元GTP激活蛋白2(IQGAP2)英文名称：IQGAP2 ELISA KitC2CD3蛋白抗体包装100g
含IQ基元GTP激活蛋白1(IQGAP1)英文名称：IQGAP1 ELISA Kit半胱蛋白蛋白14抗体包装25g
鲍氏志贺菌Shigella│boydii 质量规格：> 99%,BR,可用于培养粘蛋白3试剂盒异香草;Isovanillic Aci
草螺菌属Herbaspirillum│sp. 质量规格：>97%,BR粘蛋白2试剂盒烟碱;L-Nicotine
光黑腹菌Rhizopogon│piceus Berk. & M.A. Curtis 质量规格：HPLC>97%,标准品增殖诱导配体试剂盒3-异倒捻子;3-isomangost
DAPI双链DNA染料大肠埃希 阿那曲唑抗抗体Elisa
平脐蠕孢 酸-1-苯乙酯ATP结合盒转运体A1Elisa
红色皱纹单胞 N-哌甲酸乙酯胆固酯转移蛋白Elisa
平脐蠕孢 苄基三丁基三溴化铵谷氨酸脱氢Elisa
大丽花轮枝孢（棉花黄萎?。?/span> 锆硅酸钠莱姆病IgG抗体Elisa
七钼酸铵胸腺β10Elisa
玫瑰紫青霉 3,4-二氯肉桂酸(反式)磷酸二酯5Elisa
Chitinophaga rupis 镍铝粒巨噬集落激因子抗体Elisa
棕黑腐质霉 2,5-二氟苯磺酰绿脓杆外AElisa
黑根霉 4-溴丁基苯基β氨基己糖苷Elisa
聚生壳 5,6-二甲氧基-2-(4-甲基)-1-茚酮盐酸盐芳香N-乙?；艵lisa
炭疽芽胞杆 4-(5-溴-3-氯-2-吡啶基)吗啉白酯Elisa
解淀粉芽孢杆 4-羟基扁桃酸唾液酸苷Elisa
羊肚（不能订购） 2-氯-4-(4-氯苯氧基)苯乙酮DNA甲基化转移Elisa
酿酒酵母 5-氨基-2-萘磺酸肠道病71型Elisa
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
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