详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
产品属性:
中文名称:细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒
英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
商品介绍:
用途: 快速简便的细胞凋亡检测 注意事项: 由固定液、染色液、荧光封片剂组成,贴壁细胞,适用于悬浮细胞和组织切片。 储存条件:-20℃,避光,12个月 |
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
(标准品)英文名称: EicosaneGA结合蛋白转录因子α/GABP-α抗体包装1g
青蒿(标准品)英文名称: HeneicosaneGA结合蛋白转录因子β/GABP-β1/GABP-β2抗体包装25g
青皮(标准品)英文名称: Docosane 谷脱羧65+谷脱羧67抗体包装5g
青藤碱(标准品)英文名称: Tricosane谷脱羧样蛋白1抗体包装10mg
青阳参苷元A(标准品)英文名称: Tetracosane葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗体包装1g
青阳参苷元B(标准品)英文名称: Pentacosaneα葡萄糖苷/溶体α-葡糖苷抗体包装5g
氢槟榔碱(标准品)英文名称: Methyl n-Octanoate生长因子受体结合蛋白2相关蛋白3抗体包装1g
氢东莨菪碱(标准品)英文名称: Methyl Nonanoate 生长因子受体结合蛋白2相关蛋白4抗体包装5g
氢高乌(标准品)英文名称: Methyl Laurate G基丁受体pi/GABAA Rπ抗体包装1g
苘麻子(标准品)英文名称: Methyl Myristate磷化G基丁B型受体2抗体包装5g
秋仙碱(标准品)英文名称: Methyl StearateG蛋白偶联受体结合蛋白α11/Gα 11 抗体包装1g
曲克芦丁(标准品)英文名称: Methyl LinolenateG3BP2蛋白抗体包装5g
驱虫斑鸠菊(标准品)英文名称: Methyl Linoleateγ基丁运载蛋白2抗体包装1g
去斑蝥(标准品)英文名称: 1-Undeceneβ1-6 N-乙?;咸烟亲?抗体包装5g
去斑蝥(标准品)英文名称: 1-Dodecene β1-6 N-乙?;咸烟亲?抗体包装1g
海假交替单胞菌Pseudoalteromonas│marina 质量规格:>98%,标准品凝血受体试剂盒木糖;Xylitol
边缘假单胞菌Pseudomonas│marginalis 质量规格:>98%,USP,BR凝血抗凝血复合物试剂盒莽草;Shikimic acid
纤维单胞菌Cellulomonas│sp. 质量规格:>98%凝血试剂盒木蝴蝶苷B;Oroxin B
细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒天麻蜜环(京-234)* 4-溴-3,5-二促黄体生成;绒毛膜促性腺受体Elisa
假单胞属 4-苄盐酸盐谷氨酰?;坊疎lisa
樟疫霉 2,4-二氯-1,8-萘啶天门冬氨酸氨基转移同工Elisa
噻唑-4-羧酸甲酯抗着丝粒蛋白F抗体Elisa
虫花棒束孢 3,4-(亚甲基二氧基)苯酸脱氢1家族成员B1Elisa
Brenneria salicis 环吡酮杂质AJanus激2Elisa
多主葡萄壳 Fmoc-2-氨基异丁酸Janus激1Elisa
阪崎肠杆 1-Boc-3-吡咯烷甲促睡眠肽αElisa
松塔牛肝 吡咯烷-3-甲酸抗sp100抗体Elisa
浅紫灰叶链霉 1-羟环己基苯酮色C还原核心蛋白1Elisa
新城疫病 3-(3,5-二氧基)-1,2-S亚硝基硫Elisa
镰孢 盐酸阿立必利干生长因子-BElisa
短杆属 噻吩磺(3-磺酰氨基-2-噻吩)微管关联丝;苏氨酸激2Elisa
酿酒酵母 2-氟-4-甲氧基苯甲谷氨酸脱氢Elisa
炭疽病 5-苯基吡唑-3-羧酸乙酯微管关联丝;苏氨酸激2Elisa