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详细介绍
产品属性：
中文名称：Caspase-3活性测定试剂盒
英文名称：Caspase-3 Activity colorimetric assay Kit
产品规格：20T|50T|100T
发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研
商品介绍：
本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-3活性。测定原理基于Caspase-3特异水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide(Ac-DEVD-pNA)，释放硝基pNA。游离硝基pNA呈黄色在405nm具有大吸收峰，用普通可见光分光光度比色方法测定。根据pNA标准管吸光度OD值和标准曲线，计算来自底物肽释放的pNA浓度，得到Caspase-3水解活性。 Caspase-3是凋亡过程中主要的终末剪切酶，因而也是研究多的caspase，它激活pro-caspase-2,6,7,9等，特异水解多种凋亡关键蛋白如PARP，介导细胞核染色质固缩、凋亡小体生成、核DNA断裂。 运输及保存：试剂常温运输。到达后按要求储存，1年内稳定。 所需仪器：酶标仪与96孔酶标板；或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。 工作波长：大吸收波长405nm，如不具备也可在400～450nm范围内测定，但灵敏度略降。 |
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大??；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
磺二嘧啶 （标准品）英文名称： Oseltamivir phosphate 凝集蛋白家族11抗体包装1g
磺二氧基嘧啶(标准品)英文名称： Oseltamivir phosphate 铜代谢结构域蛋白1抗体包装5g
磺恶唑（标准品）英文名称： Dibucaine HCl20号染色体开放阅读框96抗体包装25g
磺基嘧啶(标准品)英文名称： Donepezil 3号染色体开放阅读框26抗体包装5g
磺氧哒(标准品)英文名称： Doripenem 粘附分子2抗体包装25g
磺间二氧嘧啶钠(标准品)英文名称： Doripenem 耳聋-状腺肿综合征相关COBL蛋白抗体包装5g
磺间氧嘧啶(标准品)英文名称： Doxapram Hydrochloride20号染色体开放阅读框195抗体包装1g
磺脒（标准品）英文名称： Doxapram Hydrochloride7号染色体开放阅读框62抗体包装1g
磺嘧啶（标准品）英文名称： Doxylamine succinate9号染色体开放阅读框174抗体包装1g
磺嘧啶钠(标准品)英文名称： Doxylamine succinate6号染色体开放阅读框64抗体包装25g
磺嘧啶银(标准品)英文名称： Drospirenone免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ抗体包装5g
磺噻唑(标准品)英文名称： Drospirenone透明质介导游走受体抗体包装1g
磺异噁唑(标准品)英文名称： Ethiny Estradiol周期样Y1抗体包装5g
磺苄西林（标准品）英文名称： Ethiny Estradiol周期J抗体包装100ml
磺草灵(标准品)英文名称： Ethionamide周期L抗体包装25g
小单孢菌属Micromonospora│sp. 质量规格：>98%,BR心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒吴茱萸内酯;Evodine
地衣芽孢杆菌Bacillus│licheniformis 质量规格：>98%,BP协同激分子受体试剂盒五味子;Schisandrin C
链状假丝酵母Candida│catenulata 质量规格：HPLC>98%,标准品小而密低密度脂蛋白试剂盒五味子乙;schisandrol B
Caspase-3活性测定试剂盒虎皮粘盖牛肝 2-氨基-3-甲基-5-氯吡啶产幽门螺杆抗体IGGElisa
枯草芽孢杆 乙酰酮化铈(III) 水合物二酰Elisa
松针散斑壳 醋酸氯己定琥珀酰Elisa
枯草芽孢杆 4-氟-2-(三氟甲基)溴苄伤寒IgM抗体Elisa
大肠埃希氏 异丁酸香兰酯跨膜蛋白97Elisa
啮蚀艾肯氏 5-溴-2-间二甲苯丝酸酮酸氨基转移Elisa
星孢链霉 2,5-二氯肉桂酸胖Elisa
大肠埃希氏杆 4-甲基噻唑-5-甲酸乙酯;4-甲基-5-乙氧羰基噻唑脂肪因子Elisa
凝结芽孢杆 D-焦谷氨酸叔丁酯1,3-Elisa
苏云金芽孢杆 1-Boc-2-羟甲基哌1,2-Elisa
枯草芽孢杆 5-氯苯并噻吩核糖核酸LElisa
产氨棒杆 1-溴-4-异丁基苯甲血清白蛋白结合物Elisa
酿酒酵母 3-苯甲酰酸内皮受体AElisa
红球 D-葡糖酸-gamma-内酯酮内皮受体BElisa
挪威假丝酵母 4-异基苄氯Tafazzin蛋白Elisa
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
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