详细介绍
商品介绍:
微核分析/遗传毒性分析荧光染料(DAPI)是一种蓝色核酸染料,优先染dsDNA,表现为可集中结合在DNA 双链的AT 小沟,结合后的荧光会发生20 倍增强。同时,也可以结合RNA,与DNA 不同,一般认为DAPI 染料结合于RNA 的AU 区。DAPI/RNA 的复合体(500nm)有比染料与dsDNA 复合体(460nm)更长的荧光波长。DAPI 是一种常用的多色荧光技术中的核复染剂。他的蓝色荧光可以与绿色、红色、橙黄色探针形成鲜明对比。 根据操作说明使用,染料的背景可以很低,几乎没有细胞质的背景标记。DAPI 可以用在多种实验应用中,如细胞学标记、直接或间接地基于抗体的免疫荧光分析以及mRNA 表达的原味杂交或者与特定的细胞结构荧光试剂进行共染。DAPI 也可以用来分析多色流式细胞术中。 |
产品属性:
中文名称:微核分析/遗传毒性分析荧光染料
英文名称:
产品规格:10mg
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
纤维蛋白原α(FGα)英文名称:FGα ELISA Kit7号染色体开放阅读框65抗体包装0.5mg
纤维蛋白原(FG)英文名称:FG ELISA Kit基转移cyt-19抗体包装1g
纤溶抑制因子(TAFI)英文名称:TAFI ELISA Kit单核趋化蛋白4抗体包装25g
纤溶原激活物抑制因子2(PAI2)英文名称:PAI2 ELISA KitCD34抗体包装5g
纤溶原激活物抑制因子1(PAI1)英文名称:PAI1 ELISA Kit白共同抗原抗体包装1g
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)英文名称:CLC ELISA Kit磷化环磷腺苷反应元件调节蛋白抗体包装5g
细胞周期D3(CCND3)英文名称:CCND3 ELISA Kit间隙连接蛋白37抗体包装1g
细胞周期D2(CCND2)英文名称:CCND2 ELISA Kit2型补体受体抗体包装5g
细胞周期D1(CCND1)英文名称:CCND1 ELISA Kit唾液转移1/α-2,6唾液转移抗体包装1g
细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)英文名称:SOCS3 ELISA Kit碳酐9抗体包装5g
细胞外信号调节激2(ERK2)英文名称:ERK2 ELISA Kit色P450 17抗体包装100g
细胞外基质磷糖蛋白(MEPE)英文名称:MEPE ELISA Kit色P450 7A1抗体/胆固7a羟化包装25g
细胞外基质蛋白1(ECM1)英文名称:ECM1 ELISA Kit胆固24羟化抗体包装500g
P450家族成员7A1(CYP7A1)英文名称:CYP7A1 ELISA Kit肿瘤新因子1抗体包装5g
P450家族成员3A4(CYP3A4)英文名称:CYP3A4 ELISA Kit胆固25α7羟化抗体包装1g
球形节杆菌Arthrobacter│globiformis 质量规格:含量> 99%组织蛋白去乙?;约梁锌棺聪偾虻鞍卓固?/span>
黄曲霉Aspergillus│flavus 质量规格:HPLC>98%,标准品组织蛋白S试剂盒乙型肝炎病核心抗体(HBcAb)国家参
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:>98%,BR组织蛋白L1试剂盒肠道病71型IgM抗体国家参考品
微核分析/遗传毒性分析荧光染料朗比可假丝酵母 丁基基氯化铵同源盒蛋白HOXB13检测试剂盒
四孢菇 1α-甲基雄烷-17β--3-酮/甲氢睾酮同源盒基因Six1检测试剂盒
枯草芽孢杆 反式-3-己烯酸铜蓝蛋白检测试剂盒
梨黑星 3-丁炔-2-酮透明质酸检测试剂盒
新疆盐地杆 1-BOC-2-甲透明质酸合酶2检测试剂盒
突孢毛壳 2-溴-6-氟甲苯透明质酸结合蛋白检测试剂盒
黑曲霉变种 3-亚甲基环丁透明质酸酶检测试剂盒
碱线属 1-Boc-3-羟甲基氮杂环丁烷突状表面特异性C型凝集素-间黏附分子3结合非整合素分子检测试剂盒
赤霉 9-芴酮-1-羧酸褪黑硫酸盐检测试剂盒
无环田头菇 硫异烟褪黑素检测试剂盒
Candidatus Rhizobium 2-羟基喹啉-4-甲酸脱-γ-羧基凝血酶原检测试剂盒
大肠埃希 庚酸烯酯脱嘌呤;脱嘧啶核酸内切酶;氧化还原因子1检测试剂盒
Ag-16(蘑菇) 2,2',5,5'-四氯二苯脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1检测试剂盒
柿尾孢 葡乙脱氢表雄酮检测试剂盒
地衣芽孢杆 3-氨基巴豆酸异酯脱氧胞苷激酶检测试剂盒