详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
WHI-P97 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
WHI-P97是JAK-3抑制剂。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:211555-05-4 纯度:99.13% 分子量:455.1 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
黑曲霉磷化DDX58抗体Human SPOPL (Speckle-type POZ protein-like) ELISA KIT人白介2(IL-2)免疫试剂盒
球孢白僵菌磷化DDX58抗体Human SPTA1 (Spectrin alpha chain, erythrocytic 1) ELISA KIT人白介1受体样1(IL1RL1)免疫试剂盒
酿酒酵母磷化结蛋白抗体Human SMTN (Smoothelin) ELISA KIT人白介1受体相关激-4(IRAK-4)免疫试剂盒
微杆菌属磷化结蛋白抗体Human SP1(Transcription factor Sp1) ELISA Kit人白介1受体相关激1(IRAK1)免疫试剂盒
产碱假单胞菌二价金属转运蛋白1抗体Human SLC23A1 (Solute carrier family 23 member 1) ELISA KIT人白介1受体拮抗剂(IL1Ra)免疫试剂盒
宋内氏志贺氏菌51592多巴受体D2抗体Human SRM (Spermidine synthase) ELISA KIT人白介1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)免疫试剂盒
谢瓦曲霉多巴受体D1抗体Human GPLD1(Phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D) ELISA Kit人白介1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)免疫试剂盒
*蜜环菌多巴受体相互作用蛋白1抗体Human SMS (Spermine synthase) ELISA KIT人白介1β转换(ICE)免疫试剂盒
紫穗槐根瘤菌凋亡相关蛋白激1抗体Human SLC18A3 (Vesicular acetylcholine transporter) ELISA KIT人白介-1β前体(Pro-IL-1β)免疫试剂盒
白地霉凋亡相关蛋白激2抗体Human SON (Protein SON) ELISA KIT人白介1β前体(pro-IL1B)免疫试剂盒
鲁氏不动杆菌多巴、cAMP调节磷蛋白抗体Human SMPD2 (Sphingomyelin phosphodiesterase 2) ELISA KIT人白介1β(IL-1β)免疫试剂盒
绳状篮状菌磷化多巴/cAMP调节神经磷蛋白抗体Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) ELISA KIT人白介1α(IL-1α)免疫试剂盒
青霉菌磷化多巴/cAMP调节磷蛋白抗体Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) ELISA KIT人白介19(IL-19)免疫试剂盒
乳乳球菌乳脂亚种磷化双皮质抗体Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) ELISA KIT人白介18结合蛋白(IL-18BP)免疫试剂盒
球孢链霉菌高加索变种磷化Disabled 1抗体Human SORT1(Sortilin) ELISA Kit人白介18(IL-18)免疫试剂盒
产短杆菌磷化Disabled 1抗体Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) ELISA KIT人白介17F(IL-17F)免疫试剂盒
微球菌Micrococcus│sp. 质量规格:1000μg/ml七叶皂苷C
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 质量规格:1000μg/ml七叶皂苷B
: ivcas7.00615资源名称: 苏云金芽孢杆菌 质量规格:1000μg/ml七叶皂苷A
JAK-3抑制剂(WHI-P97)Pregnenolone(标准品)英文名称: 6-TG/ThioguanineCD9蛋白抗体包装100g
Progesterone(标准品)英文名称: 6-TG/ThioguanineCD23/FcεRII抗体包装25g
Promestriene(标准品)英文名称: All-Trans-Retinoic Acid\TretinoinCD27抗体包装500g
RNH-奥美沙坦酯杂质(标准品)英文名称: All-Trans-Retinoic Acid\TretinoinCD30抗体包装25g
Rosiglitazone HCL (标准品)英文名称: BicalutamideCD43抗体包装5g
Rosiglitazone Maleate(标准品)英文名称: BicalutamideCD48抗体包装1g
Rosiglitazone(标准品)英文名称: Busulfan/MyleranCD44抗体包装5g
Sitagliptin phosphate monoh...英文名称: Busulfan/Myleran整合αX抗体包装100g
Sivelestat sodium (标准品)英文名称: Lomustine表面趋化因子受体5抗体包装25g
Sorafenib tosylate(标准品)英文名称: LomustineCD2抗体包装25g
Stanozolol(标准品)英文名称: Hydroxyurea/HydroxycarbamideC-肽抗体包装5g
Tamoxifen Citrate (标准品)英文名称: Hydroxyurea/Hydroxycarbamide钙结合蛋白抗体包装1g
Tetrabenazine(标准品)英文名称: Toremifene CitrateC-反应蛋白抗体包装5g
Toremifene Citrate(标准品)英文名称: Toremifene CitrateC-反应蛋白单克抗体包装100g
Triamcinolone Acetonide(标准品...英文名称: Toremifene Citrate环腺苷应答元件结合蛋白抗体包装25g