详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml) | 1ml | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
本品是溶于水的PI储存液,浓度为1mg/ml,只需用合适的缓冲液稀释到工作液即可。 碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物,能够嵌入碱基之间实现与DNA结合。这种结合没有或者几乎无序列倾向性,大约每4-5个DNA碱基对结合一个染料。PI也能与RNA结合,需要用核酸酶处理来区分DNA和RNA染色。水溶液中PI的大激发/发射波长是493/636nm。一旦与核酸结合,荧光信号明显增强20-30倍,大激发波长向红色波段迁移~30-40nm,大发射波长向蓝色波段迁移~15nm,从而使其大激发/发射波长变为535/617nm。PI的摩尔吸光系数相对比较低,但是其具有足够大的斯托克司频移来同时检测核酸DNA和荧光标记抗体,只需要使恰当的滤片。PI适用于荧光显微镜,共聚焦显微镜,流式细胞仪以及荧光计分析。 PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用这一特性,通常与Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定,用于细胞凋亡相关的研究。也可以用作多重荧光染色的复染剂,兼容于各种细胞标记技术,包括直接或者间接的荧光抗体检测,mRNA原位杂交,细胞结构特异性的荧光探针检测法以及组织染色。PI的单独染色也可以进行细胞周期的检测。 CAS:25535-16-4 分子式:C27H34I2N4 分子量:668.4 纯度:≥95% by HPLC 溶解性:溶于水(1mg/ml) 储存条件:4℃,避光,有效期6个月 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
跨膜丝蛋白2(TMPRSS2)英文名称:TMPRSS2 ELISA Kit活化半胱蛋白蛋白3抗体包装25g
跨膜蛋白27(TMEM27)英文名称:TMEM27 ELISA Kit7号染色体开放阅读框61抗体包装5g
克拉拉细胞蛋白16(CC16)英文名称:CC16 ELISA Kit少突胶质跨膜蛋白抗体包装1g
可溶性半乳糖凝集3结合蛋白(LGALS3BP)英文名称:LGALS3BP ELISA Kit激分子B7-1蛋白抗体包装1g
颗粒体蛋白(GRN)英文名称:GRN ELISA Kit末端补体复合物抗体包装250mg
颗粒M(GZMM)英文名称:GZMM ELISA Kit8号染色体开放阅读框55抗体包装25g
颗粒K(GZMK)英文名称:GZMK ELISA Kit补体C4a+C4b蛋白抗体包装5g
颗粒B(GZMB)英文名称:GZMB ELISA KitCD44V7抗体包装100g
颗粒A(GZMA)英文名称:GZMA ELISA KitCD44V10抗体包装25g
抗增殖细胞核抗原(PCNA)英文名称:PCNA ELISA KitCD44V4抗体包装1g
抗凝血(AT)英文名称:AT ELISA Kit紧密连接蛋白4抗体包装25g
抗缪勒管激(AMH)英文名称:AMH ELISA Kit6号染色体开放阅读框140抗体包装5g
抗利尿激(ADH)英文名称:ADH ELISA KitL型钙通道蛋白抗体包装100g
抗酒石性磷(ACP5)英文名称:ACP5 ELISA Kit电压依赖性钙通道Cav3.1抗体包装25g
抗肌蛋白(UTRN)英文名称:UTRN ELISA Kit紧密连接蛋白3抗体包装5g
: AS1.3221资源名称: 约氏乳杆菌 质量规格:含量> 99%,BR,可用于培养酯酰甘油激ζ试剂盒梓;Catalpol
多粘类芽胞杆菌Paenibacillus│polymyxa 质量规格:>99%,BR,可用于培养脂氧A4试剂盒知母皂苷 BⅡ;Timosaponin
蓝色犁头霉Absidia│coerulea 质量规格:HPLC>98%,标准品脂联受体2试剂盒栀子苷;Geniposide
碘化丙啶染液(1mg/ml)布拉克须霉 三苯吡啶粘胶蛋白;肌腱蛋白CElisa
干酪乳杆 3,5-二溴苄真胰岛Elisa
茄链格孢 呋喃铵盐整合α2β1Elisa
假单胞 邻硝基对甲砜基氯苯整合αVβ3Elisa
蕈状芽孢杆 5-磺基水杨酸整合结合唾液蛋白Elisa
亚钩针孔 四氢吡喃-4-羧酸乙酯正常T表达和分泌因子Elisa
卡伍尔链霉 番酸脂阿拉伯甘露聚糖Elisa
帕氏食氢产水 奥利司他脂蛋白αElisa
雀斑蘑菇 4-叔丁氧羰肼基脂蛋白磷脂A2Elisa
黑曲霉 吡罗昔康-β-环糊精脂蛋白脂Elisa
浸麻类芽孢杆 2,6-二氯-5-氟烟酰乙酸乙酯脂多糖;内Elisa
伯顿毕赤酵母 (R)-(+)-2-(4-羟基苯氧基)酸甲酯脂多糖结合蛋白Elisa
解烷烃游动微 3-溴-5-氯苯脂肪甘油三酯脂Elisa
盘长孢状盘孢 2-溴-3-氯苯脂肪Elisa
Microvirga aerophila 2-甲氧基-4-氟吡啶脂肪酸合成Elisa