详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
100μl | 1~3天 |
商品介绍:
本品是溶于DMSO的CCCP溶液,浓度为50mM,体积为100μl(相当于1mg的总量),常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-1(货号SY0488)或者JC-10(货号SY0490)来进行相关研究。 CCCP,即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,一种质子载体(H+ ionophore),是一种强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用;CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素氧化酶。 CCCP还具有其他功能: 1)在牛蛙交感神经方面的实验表明,CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放; 2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性; 3)对细胞内钙水平的各种调节效应; 4)抑制脂肝酶的分泌; 5)部分抑制pH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。 储存条件:-20℃,有效期12个月 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
尿激型纤溶原激活因子受体(uPAR)英文名称:uPAR ELISA Kit脱羧蛋白体36抗体包装500mg
尿激型纤溶原激活因子(uPA)英文名称:uPA ELISA Kit间隙连接蛋白40抗体包装25g
鸟苷环化激活因子2A(GUCA2A)英文名称:GUCA2A ELISA Kit间隙连接蛋白43抗体包装5g
鸟脱羧(ODC)英文名称:ODC ELISA Kit间隙连接蛋白45抗体包装100g
黏膜地址细胞黏附分子(MAdCAM1)英文名称:MAdCAM1 ELISA Kit表面趋化因子受体1抗体包装25g
尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷氧化4(NOX4)英文名称:NOX4 ELISA Kit色P450单氧化抗体包装500g
尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷氧化1(NOX1)英文名称:NOX1 ELISA Kit色C抗体包装1g
尼克酰胺-N-基转移(NNMT)英文名称:NNMT ELISA Kit角蛋白1抗体包装1g
内脂(VF)英文名称:VF ELISA Kit巨病PP65/CMV低基质磷脂蛋白抗体包装1g
内脏脂肪特异性丝蛋白抑制因子(Vaspin)英文名称:Vaspin ELISA Kit周期C抗体包装5g
内皮脂肪(LIPG)英文名称:LIPG ELISA Kit周期B1抗体包装1g
内皮抑(ES)英文名称:ES ELISA Kit球蛋白抗体包装1g
内皮型一氧化氮合(NOS3)英文名称:NOS3 ELISA Kit周期D1抗体包装1g
内皮细胞TEK酪激(Tie2)英文名称:Tie2 ELISA Kit周期D2抗体包装5g
内皮转化1(ECE1)英文名称:ECE1 ELISA Kit周期E抗体包装25g
: A272资源名称: 假诺卡氏菌 质量规格:≥85%,BR肿瘤坏死因子β试剂盒紫云英苷;astragalin
短小盒菌Parvularcula│sp. 质量规格:纯度大于98%肿瘤坏死因子α转化试剂盒知母皂苷A-Ⅲ;Timosaponin
芽孢杆菌属Bacillus│sp. 质量规格:纯度> 99%肿瘤坏死因子α试剂盒樟脑;Camphor
CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂大肠埃希氏 3′-氯苯乙酮乙脱氢Elisa
猴头—50043 3-(1-萘基)烯酸乙脱氢Elisa
米罗布里格小单孢 4,5-二氟-2-乙脱氢2Elisa
米曲霉 二甲酚乙脱氢家族1-A3Elisa
苏云金芽孢杆 2-甲酰基肉桂酸乙酰CoA羧化Elisa
大肠埃希 1-Boc-3-酮乙酰CoA羧化1Elisa
西西布哈加瓦氏 5-氯-2,4-二氟乙酰胆碱Elisa
谷氨酸棒状杆ATCC13032 N-1-Boc-2-哌甲酸甲酯乙酰胆碱受体抗体Elisa
米根霉 4-乙烯基-4'-戊基二环己烷乙酰胆碱酯Elisa
慢生根瘤 1-N-Boc-4-氧代-3-羧酸乙酯乙酰胆碱酯抗体Elisa
变异短波单胞 奈韦拉平乙酰羧化Elisa
多粘芽孢杆 5,6-二氟苯并[c][1,2,5]噻二唑乙酰乙?;?Elisa
美澳型核果褐腐病 6-溴-4-羟基喹啉-3-甲酸乙酰肝Elisa
黑曲霉 华法林钠(含异)乙型肝炎E抗原Elisa
平菇 1,4-二氨基蒽醌乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白Elisa