详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
产品属性:
中文名称:Ki67细胞增殖检测试剂盒(IHC法)
英文名称:Ki-67 cell proliferation Detection Kit(IHC)
产品规格:50T
发货周期:1~3天
商品介绍:
Ki-67 蛋白是细胞周期相关的一种核蛋白,主要表达于细胞增殖分裂的各个时期(G1、S、G2 和M 期),但是在静息的细胞(G0 期)中不表达。 Ki-67 常用于检测肿瘤细胞的生长指数(免疫组化法利用计算细胞总数中的Ki-67 阳性细胞数所占比例得到Ki-67 指数)。 |
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
着丝粒蛋白H(CENPH)英文名称:CENPH ELISA Kit癌相关蛋白2抗体包装100g
粘蛋白5B(MUC5B)英文名称:MUC5B ELISA Kit癌抗雌激耐药蛋白1包装25g
粘蛋白5AC(MUC5AC)英文名称:MUC5AC ELISA Kit胞浆支链基转抗体包装500g
粘蛋白4(MUC4)英文名称:MUC4 ELISA Kit磷化癌抗雌激耐药蛋白1抗体包装1g
粘蛋白2(MUC2)英文名称:MUC2 ELISA Kit促凋亡调节蛋白BNIP3抗体包装250mg
粘蛋白1(MUC1)英文名称:MUC1 ELISA Kit骨形态发生蛋白2受体抗体包装5g
早期生长应答因子4(EGR4)英文名称:EGR4 ELISA Kit状腺激受体共激活蛋白抗体包装1g
早期生长应答因子2(EGR2)英文名称:EGR2 ELISA Kit磷化促凋亡Bik蛋白抗体包装100mg
早期生长应答因子1(EGR1)英文名称:EGR1 ELISA Kit蛋白酪激BAP135抗体包装1g
再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)英文名称:REG3γ ELISA Kit磷化相关死亡促进因子抗体包装5g
再生胰岛衍生蛋白3α(REG3α)英文名称:REG3α ELISA Kit磷化Bax抗体包装1g
再生胰岛衍生蛋白1β(REG1β)英文名称:REG1β ELISA KitBcl-10抗体包装25g
载脂蛋白H(APOH)英文名称:APOH ELISA Kit原癌基因Bcl-6抗体包装5g
载脂蛋白F(APOF)英文名称:APOF ELISA Kit磷化Bcl-10抗体包装100g
载脂蛋白E(APOE)英文名称:APOE ELISA Kit磷化死亡调解子抗体包装25g
整合样金属蛋白与凝血样2蛋白抗体肌肉生长抑制(MSTN)PRT-060318 (PRT318)是新颖选择性的酪激 (Syk) 抑制剂, IC50值为4 nM。
Ki67细胞增殖检测试剂盒(IHC法)蟹枝毛壳 5,6,7,8-四氢-8-羟基喹啉上皮黏附分子检测试剂盒
矮小伞枝霉 4-氯-3-酸神经氨酸酶检测试剂盒
苏云金芽胞杆多窝亚种 5-甲基尿甙神经胶质纤维酸性蛋白检测试剂盒
阴沟肠杆 4'-溴-2,2,2-三氟苯乙酮神经节苷脂M3抗体检测试剂盒
埋藏曲霉 1-乙基环戊神经生长导向因子检测试剂盒
异常汉逊酵母 (3AR,7AS)-REL-八氢-1H-异盐酸盐神经生长因子检测试剂盒
泛酸枝芽孢杆 3--2-羧酸神经丝蛋白检测试剂盒
野蘑菇 二甲硫烷神经损伤诱导蛋白1检测试剂盒
多根硬皮马勃 月桂酸锂神经肽A检测试剂盒
相思根瘤 埃索美拉唑钠神经肽B检测试剂盒
乳杆属 4,4-二甲氧基丁神经肽Y检测试剂盒
枯草芽胞杆 2,3,4-三氟苯甲神经调节蛋白1检测试剂盒
猪轮状病 3-(三氟乙?;?神经粘附分子1检测试剂盒
谷氨酸棒杆 1-N-Cbz-4-基神经酰检测试剂盒
酿酒酵母 甲磺酸己酯神经型一氧化氮合成酶检测试剂盒