详细介绍
商品介绍:
PCNA 是细胞DNA 多聚酶的“δ"辅助蛋白,是真核细胞DNA 合成时所必需的一种酸性核蛋白。 PCNA 在细胞核内合成,并储存在核内,细胞处于静止状态时,其含量很低,当细胞进入增殖周期中,其表达明显增加,故PCNA 的表达高低可反映细胞增殖的活跃程度。在活检或手术切除的组织切片或细胞涂片上,用免疫技术检测到PCNA 表达增高有助于肿瘤组织的诊断。 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
PCNA cell proliferation Detection Kit(IHC) | 50T | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
脂1(LPIN1)英文名称:LPIN1 ELISA KitBRPF3蛋白抗体包装5g
脂联受体1(ADIPOR1)英文名称:ADIPOR1 ELISA KitBXDC1蛋白抗体包装25g
脂解激活脂蛋白受体(LSR)英文名称:LSR ELISA Kit脑蛋白44抗体包装5g
脂肪细胞型脂肪结合蛋白(FABP4)英文名称:FABP4 ELISA Kit脑蛋白44样蛋白抗体包装250mg
脂肪合(FASN)英文名称:FASN ELISA Kit嗜乳脂蛋白样2抗体包装1g
脂多糖结合蛋白(LBP)英文名称:LBP ELISA Kit嗜乳脂蛋白样8抗体包装5g
脂多糖(LPS)英文名称:LPS ELISA Kit嗜乳脂蛋白样9抗体包装10MG
脂蛋白脂(LIPD)英文名称:LIPD ELISA KitBTB/POZ结构域蛋白7抗体包装1g
脂蛋白关联磷脂A2(LpPLA2)英文名称:LpPLA2 ELISA Kit脑特异性血管生成抑制蛋白1抗体包装25g
脂蛋白a(Lpa)英文名称:Lpa ELISA KitBcl2相关转录因子抗体包装5g
整合β3(ITGβ3)英文名称:ITGβ3 ELISA Kit脑环核苷门控通道蛋白1抗体包装25g
整合αM(ITGαM)英文名称:ITGαM ELISA Kit癌易感基因复合蛋白4抗体包装5g
整合α3(ITGα3)英文名称:ITGα3 ELISA Kit纺锤体检查点蛋白抗体包装1g
整合α1(ITGα1)英文名称:ITGα1 ELISA Kit有丝分裂检验点蛋白BubR1抗体包装5g
真核翻译起始因子2α激3(EIF2αK3)英文名称:EIF2αK3 ELISA Kit癌相关蛋白3抗体包装5mg
整合样金属蛋白与凝血样1蛋白抗体肌肉生长抑制(MSTN)BMS-911543 是一种选择性的 JAK2 抑制剂,IC50 值为 1.1 nM,对 JAK1,JAK3 和 TYK2 的选择性相对较弱,IC50 值分别为
PCNA细胞增殖检测试剂盒(IHC法)灰黄浅黄酵母 (S)-4-N-叔丁氧羰基-2-甲基哌软骨糖蛋白39检测试剂盒
酿酒酵母 乙叉降冰生烯润滑素检测试剂盒
水稻黄单胞(水稻白叶枯)* 2'-F-dU亚磷酰单体状腺原氨酸检测试剂盒
金霉素链霉 吡唑-3-羧酸氧苄氨嘧啶检测试剂盒
巨兽芽孢杆 2-氟腺苷三磷酸磷脂酰肌检测试剂盒
三叶草根瘤 1-BOC-3-甲磺酰基氧甲基三磷酸腺苷检测试剂盒
香菇 5-氯-2,4-二氟苯三叶因子3检测试剂盒
大丽轮枝霉 2-氟-4-甲氧基苯酸色氨酰tRNA合成酶检测试剂盒
长根小奥德蘑 2--3-甲酸甲酯色素上皮衍生因子检测试剂盒
里拉微球 2-基-4-甲基吡啶性;通透性增加蛋白检测试剂盒
酿酒酵母 2,6-二甲基-4-氟甲酯杀伤球蛋白样受体检测试剂盒
拟茎点霉 7-氟-6-硝基-4-羟基喹唑啉沙眼衣原体主要外膜蛋白检测试剂盒
长盐土生古 2-乙基-2-金刚烷山梨脱氢酶检测试剂盒
大肠埃希氏 2-基丁酸乙酯上皮膜蛋白2检测试剂盒
苏云金芽孢杆库尔斯塔克亚种 叔丁基亚磺酰上皮膜抗原检测试剂盒