详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
2×100ml|2×500ml | 1~3天 |
商品介绍:
用途: 血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色 注意事项: 含磷酸盐缓冲液,等量混合后使用。对胞质染色较好,主要成分为瑞氏色素。 储存条件:室温,避光,24个月 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
巨大芽胞杆菌自噬相关蛋白18抗体Human MARVELD3 ELISA Kit猪白介22(IL-22)免疫试剂盒
杏鲍菇自噬相关蛋白4A抗体Human MAS1L ELISA Kit猪白介2(IL-2)免疫试剂盒
鲜绿青霉载脂蛋白A4抗体Human MAST1 ELISA Kit猪白介1受体拮抗剂(IL1Ra)免疫试剂盒
芽孢杆菌12脂氧合抗体Human MAST3 ELISA Kit猪白介1β (IL-1β)免疫试剂盒
血红红曲菌血管紧张III抗体Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit猪白介1α(IL-1α)免疫试剂盒
乳杆菌属腺苷环化3抗体Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit猪白介18(IL-18)免疫试剂盒
苏云金芽孢杆菌肯尼亚亚种血管动蛋白抗体Human Caspase 12 ELISA Kit猪白介17(IL-17)免疫试剂盒
水稻汉纳酵母腺病早期E1A蛋白抗体Human CD320 ELISA Kit猪白介15(IL-15)免疫试剂盒
球形赖芽孢杆菌磷化活化复制因子2抗体Human C1orf31(Cytochrome c oxidase assembly factor 6 homolog) ELISA Kit猪白介13(IL-13)免疫试剂盒
Aureimonas pseudogalii磷化活化复制因子2抗体Human TMPRSS15(Enteropeptidase) ELISA Kit猪白介12(IL-12/P70)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌磷化失调症蛋白1抗体Human SPAST(Spastin) ELISA Kit猪白介12(IL-12/P40)免疫试剂盒
香菇锚蛋白重复结构域蛋白17抗体Human MLKL(mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit猪白介10(IL-10)免疫试剂盒
果生假丝酵母胞质乙脱氢1抗体Human TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20 homolog) ELISA Kit猪白介1(IL-1)免疫试剂盒
天蓝色链霉菌ADP核糖基化样因子ARL3抗体Human HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) ELISA Kit猪白蛋白免疫试剂盒
三叶草根瘤菌花生四烯15脂氧合1抗体Human MVK(Mevalonate kinase) ELISA Kit猪γ干扰(IFN-γ)免疫试剂盒
解几丁质纤维单胞菌癌增强蛋白2抗体Human CD97(CD97 antigen) ELISA Kit猪γ淀粉(AMY)免疫试剂盒
罗伊赫海源菌Idiomarina│loihiensis 质量规格:比活度:>5000 U/mg,BC烯试剂盒盐
硫色曲霉Aspergillus│sulphureus 质量规格:>98%,植物激级脱氢E1试剂盒乙氧基血根碱
青霉属Penicillium│sp. 质量规格:>98.0%,BR激R型同工试剂盒远华蟾蜍精
迈格林华染色液(May-Grunwald Stain)仁果壳小圆孢 苯并呋喃-3-酸弓形虫IgM抗体Elisa
嗜热脂肪地芽孢杆 2-氨基-3-甲氧基酪蛋白Elisa
耐寒短杆 反式-(1R,2R)-2-氨基环戊盐酸盐a胶质系来源的神经营养因子Elisa
黑曲霉 2,4-二-5-基嘧啶b胶质系来源的神经营养因子Elisa
西宫皮生球 3-甲基-1H-吲唑乙型肝炎病表面IgG抗体Elisa
阿魏侧耳 3,3'-双噻吩络丝蛋白Elisa
枯草芽孢杆 N,1-双(叔丁氧羰基)-L-组氨酸双环己盐抗神经节苷脂抗体Elisa
苏云金芽孢杆 2-甲基-5-甲氧基反神经调节苷脂抗体Elisa
佛雷德里克斯堡假单胞 2-氨基嘧啶-5-羧酸神经节苷脂Elisa
单胞属 *贝特6-磷酸果糖激-1Elisa
灰略红链霉 甲基-4,6-O-亚苄基-Α-D-吡喃葡糖苷II型胶原蛋白Elisa
大肠埃希氏 3,5-二羟基苯甲酰肥大蛋白Elisa
草菇 2-氨基-3--5-26S蛋白体Elisa
秃裸链霉 O-乙基异脲盐酸盐嗜酸性粒过氧化物Elisa
Actinokineospora 2-二苯并[b,f][1,4]氧氮杂卓-11(10H)-酮凝血因子ⅡElisa