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详细介绍
商品介绍：
此试剂盒是用于测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。实验的灵敏度比其它如MTT, XTT 或MTS 高。由于新型细胞增殖及毒性检测溶液相当稳定，并且对细胞没有毒性，可直接加入到细胞样品中长时间孵育。 操作方法 1. 96 孔板加入细胞100μL/孔（约1×104），置37℃ 5%CO2 细胞培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃，含5% CO2 空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4. 向各孔中加入10 μl 的新型细胞增殖及毒性检测溶液。 5. 37℃下孵育1～4 小时。 6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。 结果分析 1. 细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加新型细胞增殖及毒性检测溶液，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加新型细胞增殖及毒性检测溶液，无细胞），各重复孔的OD 值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100 2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。 |
产品属性：
中文名称：CCK-8法细胞增殖检测试剂盒
英文名称：英文名称
产品规格：500T
发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
CD30分子(CD30)英文名称：CD30 ELISA Kit大脑蛋白2抗体包装1g
CD19分子(CD19)英文名称：CD19 ELISA KitB转录激活因子抗体包装250mg
CC趋化因子受体6(CCR-6)英文名称：CCR-6 ELISA KitBCL6B抗体包装5g
cAMP反应元件结合蛋白(CREB)英文名称：CREB ELISA KitBAP31蛋白抗体包装1g
Ca-ATP(Ca-ATPase)英文名称：Ca-ATPase ELISA Kit支链基转2抗体包装1g
B因子(BF)英文名称：BF ELISA KitBCL2相关蛋白A1抗体包装250mg
B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)英文名称：Bcl-2 ELISA KitB淋巴瘤蛋白3抗体包装5g
B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)英文名称：Bcl-xl ELISA Kit转录因子MYB相关蛋白B抗体包装1g
B细胞活化因子(BAFF)英文名称：BAFF ELISA Kit防御β1/Defensin β1抗体包装25g
BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)英文名称：Bid ELISA KitB活化因子受体抗体包装5g
Bcl-2相关X蛋白(BAX)英文名称：BAX ELISA KitTNF家族B激活因子抗体包装1g
Apelin 13(AP13)英文名称：AP13 ELISA Kit蛇巴曲抗体包装5g
apelin 12(AP12)英文名称：AP12 ELISA Kit大脑蛋白2抗体包装100g
Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)英文名称：Col Ⅳ ELISA Kit程序性死亡配体1抗体包装25g
Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)英文名称：PⅢP ELISA KitB7-H4抗体包装1g
糖还原相关蛋白质抗体促状腺胚胎因子(TEF)MDM2 antagonist nutlin-3 is a potent inducer of apoptosis.
CCK-8法细胞增殖检测试剂盒微小毛霉 5-溴吡啶-3-（N-乙基）甲酰磷酸化IκB激酶-α检测试剂盒
Rhizobium multihospitium 3,4-二氯苄磷酸化N-甲基-D-天冬氨酸检测试剂盒
Pseudomonas eucalypticola 3,5-二氯-2,4,6-三氟吡啶磷酸化α-氨基羟甲基恶唑酸检测试剂盒
树舌1-2 2,5-二溴对苯二甲酸二乙酯磷酸化表皮生长因子受体检测试剂盒
短小芽孢杆 6-三氟甲基-2-氧化磷酸化肌球蛋白轻链检测试剂盒
短小芽孢杆 4-氟-2-甲氧基苯酸磷酸化神经丝H检测试剂盒
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瑞士乳杆 三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)镨(Ⅲ)[核磁共振位移试剂]磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶检测试剂盒
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