以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
XTT细菌增殖及细菌毒性检测试剂 | XTT Bacteria Proliferation and Cytotoxicity Kit | 500T|1000T | 1~3天 |
商品介绍:
XTT(二甲氧唑黄)是一种类似于MTT 的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,活细菌线粒体中存在与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶,可将黄色的XTT 还原成水溶性的橘黄色的甲月赞。生成的甲臜能够溶解在组织培养基中,不形成颗粒,可直接用酶联免疫检测仪检测定吸光值。 操作方法 1. 96 孔板加入细菌100μL/孔(约1×104),置37℃ 5%CO2 细菌培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃,含5% CO2 空气及100%湿度的细菌培养箱中孵育适当时间。 4. 向各孔中加入20 μl 的XTT 工作液。 5. 37℃下孵育1~4 小时。 6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
DAB2互作蛋白(DAB2IP)英文名称:DAB2IP ELISA Kit磷化癌易感基因1抗体包装100mg
C型钠尿肽(CNP)英文名称:CNP ELISA Kit磷化癌易感基因1抗体包装25mg
C肽(C-Peptide)英文名称:C-Peptide ELISA Kit磷化非受体性蛋白酪激ETK抗体包装1g
C反应蛋白(CRP)英文名称:CRP ELISA Kit磷化B-Raf抗体包装5g
CXC趋化因子受体4(CXCR4)英文名称:CXCR4 ELISA Kit癌易感基因相互作用蛋白1抗体包装500g
CXC趋化因子受体3(CXCR3)英文名称:CXCR3 ELISA Kit磷化癌易感基因相互作用蛋白1抗体包装100g
CXC趋化因子配体16(CXCL16)英文名称:CXCL16 ELISA Kit磷化相关死亡促进因子抗体包装500g
CXC趋化因子13(Cxcl13/Blc/Scyb13)英文名称:Cxcl13/Blc/Scyb13 ELISA Kit磷化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体包装1g
CD8分子(CD8)英文名称:CD8 ELISA Kit磷化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体包装1g
CD4分子(CD4)英文名称:CD4 ELISA Kit磷化B-Raf抗体包装1g
CD45分子(CD45)英文名称:CD45 ELISA Kit磷化B-Raf抗体包装25g
CD44分子(CD44)英文名称:CD44 ELISA Kit磷化Bcl-xL蛋白抗体包装5g
CD3分子(CD3)英文名称:CD3 ELISA Kit高表达神经上皮蛋白BTG3抗体包装1g
CD34分子(CD34)英文名称:CD34 ELISA KitB迁移基因4抗体包装25g
CD33分子(CD33)英文名称:CD33 ELISA KitBCL2相互作用蛋白质抗体包装5g
血管内皮迁移蛋白抗体肝核因子1β(HNF1β)Deltarasin is a small molecular inhibitor of KRAS-PDEδ interaction with Kd of 38
XTT细菌增殖及细菌毒性检测试剂*正红菇 5-溴-2-甲酯类固5α还原酶2检测试剂盒
猪丹丝 2-基吡类趋化因子受体CMLR1检测试剂盒
密苏里游动放线 (S)-2-甲基吡咯烷盐酸盐类胰蛋白酶检测试剂盒
粉红单端孢霉 3-(氨甲酰甲基)-5-甲基己酸冷球蛋白检测试剂盒
酿酒酵母 N-Boc-3-甲基-4-酮冷诱导RNA结合蛋白检测试剂盒
蜡状芽孢杆 3-溴-4-氯吡啶盐酸盐利什曼原虫抗体检测试剂盒
根瘤 4-氟-D-苯氨酸粒集落激因子检测试剂盒
肠沙门氏肠炎亚种 硫酸原黄素粒巨噬集落激因子检测试剂盒
面粉增白剂速测卡 6-溴-2-氯喹啉连接蛋白-1检测试剂盒
桔橙链霉 1,7-二旋氧杂[5.5]十一烷链激酶检测试剂盒
Pilidium concavum 4-氟-3-甲酸甲酯亮氨酸氨肽酶检测试剂盒
藻渣梭 4-氟-2-甲酸甲酯亮氨酸脑啡肽检测试剂盒
烟曲霉 2-(4-甲基-1-哌)苯磷酸苷油酸脱氢酶检测试剂盒
黑色小单孢 3,4-二苄氧基磷酸果糖激酶检测试剂盒
茎生拟茎点霉 4-三乙氧硅基联苯磷酸化AKT蛋白检测试剂盒