详细介绍
商品介绍:
CHIR-98014是一种有效的,细胞通透的GSK-3抑制剂,可抑制GSK-3α和GSK-3β的活性,IC50值分别为0.65和0.58nM;CHIR-98014对cdc2和erk2的作用较弱。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:252935-94-7 纯度:98.0% 分子式:C??H??Cl?N?O? 分子量:486.31 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
CHIR-98014 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
蕈状芽孢杆菌胰高血糖样肽-1抗体Human Syntaxin 6 ELISA Kit大鼠基质金属蛋白7(MMP-7)免疫试剂盒
苏云金芽孢杆菌颗粒蛋白前体抗体Human TADA2B ELISA Kit大鼠基质金属蛋白5(MMP-5)免疫试剂盒
硬结节杆菌磷脂?;鞍拙厶?/span>1抗体Human STX1A(Syntaxin-1A) ELISA Kit大鼠基质金属蛋白4(MMP-4)免疫试剂盒
鞘菌糖原合激3α抗体Human TADA2L ELISA Kit大鼠基质金属蛋白3(MMP-3)免疫试剂盒
*灰葡萄孢庆大霉单克抗体Human TADA3L ELISA Kit大鼠基质金属蛋白2/明胶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫试剂盒
粪肠球菌谷胱甘肽硫转移ω1抗体Human TAF1L ELISA Kit大鼠基质金属蛋白14(MMP-14)免疫试剂盒
毛霉属间隙连接蛋白31抗体Human TAF1 ELISA Kit大鼠基质金属蛋白13(MMP-13)免疫试剂盒
弓形虫(GJS-3株)甘-N-甲基转移Human TAF3 ELISA Kit大鼠基质金属蛋白10(MMP-10)免疫试剂盒
北京掷孢酵母G蛋白偶联受体75抗体Human TAF7 ELISA Kit大鼠基质金属蛋白1(MMP-1/Collagenase I)免疫试剂盒
盖替隐球酵母GATA结合蛋白4抗体Human TAF6L ELISA Kit大鼠肌质网膜钙ATP(SERCA)免疫试剂盒
浅灰小双孢菌兔抗γ1基丁抗体Human TAF5L ELISA Kit大鼠肌激同工MM(CK-MM)免疫试剂盒
广西腐霉G蛋白偶联受体GPR85蛋白抗体Human DNASE1(Deoxyribonuclease-1) ELISA Kit大鼠肌激同工MB(CK-MB)免疫试剂盒
黑曲霉庆大霉抗体Human TAF9(Transcription initiation factor TFIID subunit 9) ELISA Kit大鼠肌激同工BB(CK-BB)免疫试剂盒
空肠弯曲杆菌半乳糖凝集9抗体Human TAF9B ELISA Kit大鼠肌球蛋白(MYS)免疫试剂盒
缘毛壳促代谢型谷受体2+4抗体Human Syntaxin 10 ELISA Kit大鼠肌红蛋白(MYO/MB)免疫试剂盒
鞘杆菌GPNMB抗体Human STX1A(Syntaxin-1A) ELISA Kit大鼠肌酐(Cr)免疫试剂盒
小单孢菌属Micromonospora│sp. 质量规格:分析标准品,99%黄杞苷
天麻萌发菌Mycena│sp. 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)晶兰苷
猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 质量规格:分析标准品8-O-乙酰山栀苷酯
GSK-3抑制剂(CHIR-98014)A2AR 腺苷A2A受体抗体氨胍碳氢盐 分析标准品
AACT-Alpha1 α-1抗胰糜蛋白抗体顺式-乌头 98%
AAK1 AP2关联激1抗体N-(4-氨酰)-L-谷氨 97%
AARS2 氨酰tRNA合成2抗体花生四烯 ≥99.0% (GC)
AAT α-1抗胰蛋白抗体腺苷-5'- from yeast, ≥97%
AATK AATK凋亡关联酪氨激抗体对氨苯胂 分析标准品
AATF 拮抗凋亡转录因子抗体4-氨联苯 AR
ABCA1 腺苷三结合盒转运体A1抗体4-氨联苯 分析标准品