詳細(xì)介紹
人胚肺成纖維原代細(xì)胞
英文名稱 | Human Embryonic Lung Fibroblast Cells | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
包裝 | 瓶裝 | 組織來源 | 胚胎;肺組織 |
貨號(hào) | GOY-01X1170 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
人胚肺成纖維細(xì)胞分離自胚肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胚肺成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胚肺成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))
1、取出細(xì)胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3、細(xì)胞傳代:
1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細(xì)胞一次。
2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,37℃消化 3min 左右;顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入培養(yǎng)液終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。
NIH:OVCAR-3細(xì)胞,卵巢癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,KYSR450細(xì)胞 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S2 NXPH1 Others Rat 大鼠 NXPH1 / Neurexophilin-1 人細(xì)胞裂解液 QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 腎癌(瘤株),Ke-3細(xì)胞 HL-60 兔原代脾基質(zhì)細(xì)胞 大鼠原代視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞
成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated
IL21重組小鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 Protein
CD84 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD84 蛋白
SIGLEC5重組人 SIGLEC5 蛋白 Protein
大鼠利肽受體1(NPR1)試劑盒 ,英文名: NPR1 ELISA Kit
Monkey follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit促卵泡素(FSH)試劑盒
RatIerferonα,IFN-αELISAKit 大鼠α干擾素(IFN-α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGABA(MouseGamma-aminobyricacid)ELISAKit小鼠γ氨基
細(xì)胞過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次
RatProinsulin,PIELISAKit大鼠胰島素原(PI)試劑盒規(guī)格:96T/48T
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
α戊二酸脫氫酶(α-KGDH)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
人胚肺成纖維原代細(xì)胞小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒
humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒20次
HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)試劑盒規(guī)格:96T/48T
LY9重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 Protein
AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mgAMH/MIS Muellerian抑制因子抗原
ANGPTL4重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
HEPACAM2 Protein Rat 重組大鼠 HepaCAM2 蛋白