小鼠結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 小鼠細(xì)胞 英文名稱： C127 人肝癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人肝癌組織源細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞 大鼠原代嗅球神經(jīng)元細(xì)胞

小鼠結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?，外膜（纖維膜或漿膜）。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形、外縱行平滑??；結(jié)腸運(yùn)動(dòng)少而緩慢，對(duì)刺激的反應(yīng)也較遲緩。結(jié)腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運(yùn)動(dòng)和物質(zhì)分泌、誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)以及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等研究中起著重要的作用。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。結(jié)腸平滑肌運(yùn)動(dòng)活性受到神經(jīng)遞質(zhì)、胃腸激素和藥物等因素的調(diào)節(jié)。隨著現(xiàn)代胃腸動(dòng)力學(xué)研究的進(jìn)展，對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的研究已從器官、組織水平發(fā)展到細(xì)胞、分子水平，要求在胃腸道單個(gè)平滑肌細(xì)胞標(biāo)本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)。體外培養(yǎng)細(xì)胞，由于影響因素單一，是研究細(xì)胞功能以及相應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的基礎(chǔ)。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

SW038-C2-tk細(xì)胞，轉(zhuǎn)染了tk基因的SW038-C2細(xì)胞 副溶血性弧菌 人臍靜脈平滑肌細(xì)胞RNAHUVSMC miRNA5 μg  試劑耗材  人臍靜脈平滑肌細(xì)胞 人胚肺細(xì)胞，NCI-H1563[H1563]細(xì)胞 MLTC-1(間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)  CL-0149MCF-7 人原代子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 豬原代胸腺成纖維細(xì)胞

GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原)

BLOC1S2 Protein Human 重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

IL1R2重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

PGLYRP1 Protein Mouse 重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ANP32A重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠谷酰胺(Gln)試劑盒 ，英文名： Gln ELISA Kit

Porcine ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 豬α干擾素(IFN-α)試劑盒

出血性大腸桿菌(EHEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-1Alpha/CCL3(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Alpha)ELISAkit人巨噬細(xì)胞性蛋白1α

體液科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定性試劑盒20次

ELISAKit2,3-DPG犬2,3-二0酸甘油酸

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒   48T

豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(-PCR法)   48T

小鼠結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat monocyte chemotactic protein 3 (MCP-3/CCL7) ELISA Kit 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)試劑盒

Humanansferfactor,TFELISAKit 人轉(zhuǎn)移因子(TF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Human25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit人25羥基3

飲料果膠化學(xué)比色法定量試劑盒20次

MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit小鼠L苯解氨酶(PAL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

OPCML重組人 OBCAM / OPCML 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

微粒體S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)重組蛋白 Recombinant Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1)

KIRREL重組人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CADM1 Protein Human 重組人 SynCam / CADM1 / TSLC1 / IGSF4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。