詳細(xì)介紹
小鼠精原干原代細(xì)胞
英文名稱 | Mouse Spermatogonial Stem Cells | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
包裝 | 瓶裝 | 組織來源 | 睪丸組織 |
貨號 | GOY-01X1173 | 細(xì)胞形態(tài) | 球形 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠精原干細(xì)胞分離自睪丸組織;精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞,是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞。精原干細(xì)胞的一些優(yōu)勢使其成為動(dòng)物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項(xiàng)生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)機(jī)制的深入研究,精子發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染,異體、異種移植技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動(dòng)睪丸內(nèi),精子發(fā)生時(shí)一個(gè)受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,精原干細(xì)胞(SSCs)一方面進(jìn)行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細(xì)胞直至后生成精子。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處,是哺乳動(dòng)物精子發(fā)生的原始細(xì)胞,也是動(dòng)物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細(xì)胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動(dòng)物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠精原干細(xì)胞采用先機(jī)械吹打、后蛋白酶消化,結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠精原干細(xì)胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))
1、取出細(xì)胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3、細(xì)胞傳代:
1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細(xì)胞一次。
2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,37℃消化 3min 左右;顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入培養(yǎng)液終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。
SW-13細(xì)胞,腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞 NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,Hs 683細(xì)胞 RF/6A(猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞) kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株 人原代子宮蛻膜基質(zhì)細(xì)胞 人原代頸靜脈球瘤細(xì)胞
ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原
CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白
IFNGR2重組小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Rat 重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)試劑盒 ,英文名: GAD-Ab-IgM ELISA Kit
Rabbit ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 兔子白介素9(IL-9)試劑盒
粘附性大腸桿菌(EAEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitformIgM(HumanmembraneIgM)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白M
體液賴(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitAE禽腦脊髓
心肌鈣蛋白 (c) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
CXCL8(CXCL-8) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
結(jié)蛋白 (Desmin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
雌三醇 (E3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠精原干原代細(xì)胞豬血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒
Human myogenin (MYOG) ELISA Kit 人肌細(xì)胞生成素(MYOG)試劑盒
RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforai-PIVIgM(Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody)ELISAKit人抗副流感病毒IgM抗體
血液5’-核苷酸酶(5’-)活性比色法定量試劑盒20次
PorcineImmunoglobulinM,IgMELISAKit豬免疫球蛋白M(IgM)試劑盒
TF重組小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 蛋白 Protein
干擾素誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)關(guān)聯(lián)病毒抑制蛋白(Viperin)重組蛋白 Recombinant Virus Inhibitory Protein (Viperin)
MAPK12重組人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
BLMH Protein Human 重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FCGR2A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His 標(biāo)簽)