小鼠腦成纖維原代細(xì)胞公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：小鼠原代腦成纖維細(xì)胞 小鼠癌 英文名稱(chēng)： EMT-6 人組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人組織源細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 晶狀體上皮細(xì)胞 大鼠原代小腦顆粒細(xì)胞

小鼠腦成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠腦成纖維細(xì)胞分離自腦組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞)   tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL  家貓肺細(xì)胞;FCA-L2  OCM-1A細(xì)胞，人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞 綠色木霉 人原代子宮內(nèi)膜干細(xì)胞 小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞

TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)重組蛋白 Recombinant TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)

BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

KYNU重組小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MET Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白

RUVBL1重組人 RUVBL1 / RVB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠鉤端IgG(Leptospira IgG)試劑盒 ，英文名： Leptospira IgG ELISA Kit

Porcine ierleukin 10 (IL-10) ELISA Kit 豬白介素10(IL-10)試劑盒

甲型副氏菌(SPA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T

CLIAKitforMIC-1humanELISAkit人巨噬細(xì)胞抑制因子-1試劑盒

體液鎂離子(Mg)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒50次

ELISAKitSAA牛血清樣蛋白A

異育銀鯽趨化因子CCL5   英文名稱(chēng)：   Freshwater fish Chemokine C-C motif ligand 5   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CCL-5

異育銀鯽免疫球蛋白D   英文名稱(chēng)：   Freshwater fish Immunoglobulin D   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IgD

異育銀鯽免疫球蛋白M   英文名稱(chēng)：   Freshwater fish Immunoglobulin M   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IgM

異育銀鯽白細(xì)胞間介素22   英文名稱(chēng)：   Freshwater fish Ierleukin 22   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IL-22

小鼠腦成纖維原代細(xì)胞鴨子胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 試劑盒

Human ai brain tissue aibody (ABAb) ELISA Kit 人抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒

HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAD(Humanamiodarone)ELISAKit人呋同

血液總?cè)樗岜壬ǘ吭噭┖?span>20次

Mouseprostatespecificaigen,PSAELISAKit小鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒

SCARB2重組人 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BIRC2 Protein Human 重組人 cIAP1 / HIAP2 蛋白 (AVI 標(biāo)簽)

SSPA Protein E. coli 重組大腸桿菌 ssPA / Stringent starvation protein A 蛋白 (His 標(biāo)簽)

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。