小鼠膀胱成纖維原代細胞公司正在銷售的產品：小鼠原代膀胱成纖維細胞 小鼠白血病細胞 英文名稱： L1210 人食管癌組織源成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒 人食管癌組織源成纖維細胞培養(yǎng) 大鼠頸上皮細胞培養(yǎng)基 100mL 表皮黑色素細胞 大鼠原代下腔靜脈內皮細胞

小鼠膀胱成纖維原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠膀胱成纖維細胞分離自膀胱組織；膀胱是一個儲尿器官，在哺乳類動物，它是由平滑肌組成的一個囊形結構，位于骨盆內，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成，由內向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成，稱為逼尿肌，逼尿肌收縮，可使膀胱內壓升高，壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌，形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層：即漿膜層（蜂窩脂肪組織）、肌肉層（逼尿肌、膀胱三角區(qū)肌）和黏膜層（極薄的一層移行上皮組織）。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的膀胱成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原，研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來，堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用、與生物學行為之間的關系以及治療上的應用已受到重視。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠膀胱成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠膀胱成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 人細胞裂解液   C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細胞裂解液   MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細胞裂解液 人原代椎間盤纖維環(huán)細胞 大鼠原代卵巢顆粒細胞

微粒體S轉移酶1(MGST1)重組蛋白 Recombinant Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1)

CADM1 Protein Human 重組人 SynCam / CADM1 / TSLC1 / IGSF4 蛋白 (His 標簽)

OPCML重組人 OBCAM / OPCML 蛋白 (His 標簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

KIRREL重組人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠高遷移率族蛋白1(HMGB1)試劑盒 ，英文名： HMGB1 ELISA Kit

Rabbit laminin / laminin (LN) ELISA Kit 兔子層連蛋白/板層素(LN)試劑盒

基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHCII/AgBII/H-1IIELISAKit大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類

體液離子(Na)濃度化學比色法定量試劑盒20次

ELISAKitNP-Y牛神經肽Y

猩紅熱鏈球菌(ST)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

流行性腮腺病毒(MV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

瘧原蟲(Pm)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉基因植物35S基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

小鼠膀胱成纖維原代細胞魚補體3(C3)試劑盒

Human aidiuretic hormone / vasopressin / arginine vasopressin (ADH/VP/AVP) ELISA Kit 人抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒

HumanVitaminA,VAELISAKit 人A(VA)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforADH/VP/AVP(Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin)ELISAKit小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素

血液乙酰酯酶活性熒光法定量試劑盒20次

Mousereducedglathione,GSHELISAKit小鼠還原型(GSH)試劑盒

ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)重組蛋白 Recombinant Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)

KIAA1279重組人 KIAA1279 蛋白 Protein

CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)