小鼠椎間盤纖維環(huán)原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠原代椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（EGFP標(biāo)記） Mouse 人小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 外周血白細(xì)胞 大鼠原代肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

小鼠椎間盤纖維環(huán)原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞分離自椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個(gè)密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚，而后側(cè)較薄。纖維環(huán)的前部有強(qiáng)大的前縱韌帶，后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細(xì)胞密度為9000個(gè)細(xì)胞/mm3，其外層的細(xì)胞呈梭型，主要屬于纖維細(xì)胞，內(nèi)層細(xì)胞呈圓形，主要屬于軟骨細(xì)胞。在培養(yǎng)的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn)，它們的核較圓，核仁較明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級(jí)深酶體和次級(jí)深酶體。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒，纖維環(huán)細(xì)胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環(huán)生理代謝活動(dòng)所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少，纖維環(huán)的生物性能就會(huì)減弱，椎間盤開始退變。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

大鼠垂體瘤細(xì)胞;GH3  小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞   EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8  3T3-Swiss albino細(xì)胞，胚胎成纖維細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,CRL細(xì)胞 CM-M048小鼠腸巨噬細(xì)胞MET Others Rat 大鼠 c-MET 人原代胎盤周細(xì)胞 豬原代氣管上皮細(xì)胞

rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein 100ugrHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 重組乙肝病毒e抗原

CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白

HA重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

GZMH Protein Human 重組人 Granzyme H 蛋白

VNN1重組人 VNN1 / Vanin-1 蛋白 Protein

大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒 ，英文名： E3/UBPL ELISA Kit

Pig phosphorylation of exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 豬0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒

羊特定基因序列(Ovine)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMAdCAM-1(Humanmucosaladdressincelladhesionmolecule-1)ELISAKit人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子

體液乙酰酯酶活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitVTG鯉魚卵黃蛋白原

小鼠總   英文名稱：   Mouse Total Cholesterol   規(guī)格：      英文縮寫：   TC

小鼠壞死因子   英文名稱：   Mouse Total Tumor Necrosis Factor   規(guī)格：      英文縮寫：   TNF

小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體   英文名稱：   Mouse ansferrin Receptor   規(guī)格：      英文縮寫：   TFR

小鼠轉(zhuǎn)移趨化生長(zhǎng)因子β   英文名稱：   Mouse ansforming Growth Factor β   規(guī)格：      英文縮寫：   TGFβ

小鼠椎間盤纖維環(huán)原代細(xì)胞小鼠受體(FOLR)試劑盒 96T/48T

Residues of rat and bovine serum albumin detection ELISA Kit 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)試劑盒

HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor17-KSELISAKit大鼠17-同類固醇

飲料抗壞血酸比色法定量試劑盒20次

MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit小鼠鉤端IgG(LepIgG)試劑盒96T96T

SPINK4重組小鼠 SPINK4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

酸脫氫酶0酸酶(PDP)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)

COMMD9重組人 COMMD9 蛋白 Protein

CD300A Protein Human 重組人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 蛋白

DDR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白