兔肌腱成纖維原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔肌腱成纖維細胞分離自肌腱組織；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織，便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構(gòu)成，色紅質(zhì)軟，有收縮能力，肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成，色乳白較硬，沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀，闊肌的肌腱闊而薄，呈膜狀，又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌，而肌腱即為白肌，分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。成纖維細胞是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肌腱成纖維細胞采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的兔肌腱成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

rCSC, 大鼠心肌細胞  OVCAR-3(人癌細胞)     中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1  人少突膠質(zhì)細胞 人肺癌細胞，SK-MES-1細胞 P3X63Ag8.653(骨髓瘤細胞)  RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細胞裂解液 兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細胞 羊原代支氣管上皮細胞

Melamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 1mgMelamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物

CARHSP1 Protein Human 重組人 CARHSP1 蛋白

IFNA4重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

VDR Protein Mouse 重組小鼠 VDR / NR1I1 蛋白

S100A8重組人 S100A8 / CAGA 蛋白 Protein

大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)試劑盒 ，英文名： COX-1 ELISA Kit

Rabbit ai brain tissue aibody (ABAb) ELISA Kit 兔抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒

登革熱病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitformouseIgGELISAkit小鼠免疫球蛋白IgG

體液環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE)總活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitⅠCTP人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽

豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血管內(nèi)皮細胞生長因子A（VEGF-A）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔肌腱成纖維原代細胞鴨α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human adrenal coex aibody (AAA) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)試劑盒

HumanFolicacid,FAELISAKit 人(FA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAChEELISAKit大鼠乙酰酯酶

藥品阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性試劑盒20次

Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD52重組大鼠 CD52 / CDW52 蛋白  Protein

GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白

UNG重組人 Uracil-DNA glycosylase / UNG 蛋白 (GST 標簽) Protein

ASGR2 Protein Human 重組人 ASGR2 蛋白 (His 標簽)

DLL1 Protein Mouse 重組小鼠 DLL1 / Delta-1 蛋白 (His 標簽)