兔血管外膜成纖維原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：兔原代血管外膜成纖維細(xì)胞 人永生化角質(zhì)細(xì)胞 英文名稱： Hacat 人胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng) 人皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 胃粘膜上皮細(xì)胞 人原代尿道上皮細(xì)胞

兔血管外膜成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

兔血管外膜成纖維細(xì)胞分離自血管外膜組織；血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主，當(dāng)血管受損傷時(shí)，成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動(dòng)脈中膜和外膜的交界處，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細(xì)胞是血管外膜的主要組成細(xì)胞之一，其主要生理功能合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔血管外膜成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔血管外膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

RTN4R Others Mouse 小鼠 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液   TNFRSF8 Others Human 人 TNFRSF8 / CD30 人細(xì)胞裂解液   PDPN Others Human 人 PDPN / Podoplanin 人細(xì)胞裂解液 兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 人原代成骨細(xì)胞

Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白 Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

GPT Protein Rat 重組大鼠 GPT1 / GPT 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RCN3重組人 RCN3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒 ，英文名： NF-κB p65 ELISA Kit

Rabbit heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 兔熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒

嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseBeta-catenin,Beta-catELISAKit小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白

體液肌酸激酶(CK)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

2D3/DVD/DHVD3OH人1,25二羥基D3

總合成酶（NOS）測(cè)試盒[測(cè)總NOS（T－NOS）]

（NO）測(cè)定試劑盒（微板法）

（NO）測(cè)定試劑盒（還原酶法）

ATP酶測(cè)試盒（測(cè)普通組織勻漿的Na+K+、Ca2+Mg2+－ATP酶，樣本前處理不需高速離心）

兔血管外膜成纖維原代細(xì)胞豬肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)試劑盒

Human kallikrein 8 (KLK 8) ELISA Kit 人8(KLK 8)試劑盒

guineapigIerleukin6,IL-6ELISAKit 豚鼠白介素6(IL-6)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforANGIIR-1(HumanangiotensionIIreceptor1)ELISAKit人血管緊張素Ⅱ受體1

血液脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量試劑盒20次

Porcinediamineoxidase,DAOELISAKit豬氧化酶(DAO)試劑盒

IL2RG重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白  Protein

GLUT1(Glucose transporter type 1 0.5mgGLUT1(Glucose transporter type 1) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(抗原)

FCGR3B重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein

APOL1 Protein Human 重組人 APOL1 / apolipoprotein L1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

KIRREL3 Protein Mouse 重組小鼠 KIRREL3 / NEPH2 蛋白 (His 標(biāo)簽)