小鼠冠狀動脈平滑肌原代細胞公司正在銷售的產品：小鼠原代冠狀動脈平滑肌細胞 非洲綠猴細胞 英文名稱： VERO 人晶狀體上皮細胞培養(yǎng)試劑盒 人晶狀體上皮細胞培養(yǎng) 大鼠外周血白細胞培養(yǎng)基 100mL 少突膠質前體細胞（懸?。? 大鼠原代真皮微血管內皮細胞

小鼠冠狀動脈平滑肌原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇，經肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分，細胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道；它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化，調節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞，對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

SUP-B15人Ph+急淋白血病細胞系 (GIBCO)+20%FBS  人微血管內皮細胞HMMEC  U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 骨肉瘤細胞,Saos-2細胞 CFPAC-1(胰腺癌細胞) 兔肝間質細胞永生化細胞 人原代羊水干細胞

GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein 0.5mgGFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 膠質纖維酸性蛋白(抗原)

BPI Protein Human 重組人 BPI 蛋白 (His 標簽)

CD47重組大鼠 CD47 蛋白  Protein

PLA2G1B Protein Mouse 重組小鼠 PLA2G1B / Phospholipase-A2 蛋白 (His 標簽)

STK16重組人 STK16 / PKL12 / MPSK 蛋白 (His & NusA 標簽) Protein

大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 ，英文名： BMPR-Ⅱ ELISA Kit

Porcine procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒

流感嗜血桿菌(Hi)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMLC(HumanMyosinlightChain)ELISAKit人肌球蛋白輕鏈

體液脊髓過氧化酶(MPO)活性(DTNB)高質敏感比色法定量試劑盒20次

ELISAKitHCⅡ犬肝素輔因子Ⅱ

轉基因植物Bt基因核酸試劑盒   48T

轉基因植物Sad1基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉基因植物Sad1基因核酸試劑盒   48T

轉基因植物cry1A基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

小鼠冠狀動脈平滑肌原代細胞小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 大鼠骨保護素(OPG)試劑盒

Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenHeatShockProtein20,HSP-20試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

BDNF重組小鼠 / 人 BDNF 蛋白 Protein

彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1)重組蛋白 Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1)

VIP重組人 Vasoactive intestinal peptide / VIP 蛋白 Protein

CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白

CD3D & CD3E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白