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產品名稱：小鼠脊髓成纖維原代細胞
英文名稱：Mouse Spinal Cord Fibroblast Cells
規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：GOY-01X1177
分類：小鼠原代細胞

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

小鼠脊髓成纖維細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經系統(tǒng)延伸部分。中樞神經系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形（蝴蝶型）灰質區(qū)，主要由神經細胞構成；在灰質區(qū)周圍為白質區(qū)，主要由有髓神經纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經（稱為脊神經）分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié)，31對脊神經就是由不同的脊椎發(fā)出的。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的脊髓成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持組織的正常形態(tài)；合成和釋放細胞外基質；組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠脊髓成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠脊髓成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

準備DMEM高糖，10% 優(yōu)質胎牛血清。

1）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

2）凍存液：90%培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。

2、細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

1、收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

3、用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4、請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的培養(yǎng)基。

5、建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和微生物菌種查詢網技術部溝通交流。

6、該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7  大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化);PC-12(低分化) 肝癌細胞，BEL-7402細胞 D3細胞，129小鼠ES細胞  TPO Others Human 人 Thyroid peroxidase / 人主動脈瓣膜間質細胞永生化細胞 大鼠原代食管平滑肌細胞

IL-23(Interleukin-23 0.5mgIL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原

BPHL Protein Human 重組人 BPHL 蛋白 (His 標簽)

NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白  Protein

MCAM Protein Mouse 重組小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 (His 標簽)

GRK6重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒 ，英文名： BMP-2 ELISA Kit

Porcine procollagen peptide (P III NP) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒

埃博拉病毒(EBOV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-5(Humanmacrophageinflammatoryprotein5)ELISAKit人巨噬細胞性蛋白5

體液結構型內皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitCD8犬白細胞分化抗原8

轉基因植物EPSPS基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉基因植物EPSPS基因核酸試劑盒   48T

轉基因植物Sad1基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

轉基因植物Sad1基因核酸試劑盒   48T

小鼠脊髓成纖維原代細胞豬血栓調節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒

Human myosin (Myosin) ELISA Kit 人肌球蛋白(Myosin)試劑盒

Rabbitprothrombinfragme1+2,F1+2ELISAKit 兔原片段F1+2(F1+2)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAi-TM甲狀腺微粒體抗體(TM抗體)

血小板因子4(PlateletFactorIV)活性熒光定量試劑盒20次

Porcineiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒

CSRP1重組小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白 Protein

酶Ⅱ(CA2)天然蛋白 Native Carbonic Anhydrase II (CA2)

CFHR2重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

MDH1 Protein Rat 重組大鼠 MDHA / MDH1 蛋白