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详细介绍
商品介绍：
本品为IV型胶原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion units），特别适用于胰岛组织的消化。 本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维?；购衅渌囊恍┑鞍酌?，多糖酶，脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白、多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。 胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。 目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向： 1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备； 2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备； 3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备； 4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。 酶活力单位定义 在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1μM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。 储存条件：4℃避光，有效期两年 |
产品属性：
中文名称：胶原酶IV型
英文名称：Collagenase IV
产品规格：100mg
发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大??；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
吗啉恶（标准品）英文名称： Caffeic acid磷化巨噬集落激因子受体抗体包装5g
吗贝(标准品)英文名称： Caffeic acid微管结合蛋白CYLD抗体包装100g
吗替麦考酚酯/霉酚酯（标准品）英文名称： Caffeic acid磷化微管结合蛋白CYLD抗体包装25g
麦白霉（标准品）英文名称： Neomycin sulfate磷化CBX5抗体包装5g
麦迪霉（标准品）英文名称： Neomycin sulfate霉抗体包装100mg
麦芽三糖(标准品)英文名称： Diphenhydramine hydrochloride磷化非受体酪激c-Abl抗体包装1g
麦芽糖（标准品）英文名称： Diphenhydramine hydrochloride磷化质膜微囊蛋白-1抗体包装500mg
没食子乙酯(标准品)英文名称： Polyinosinic acid磷化周期依赖激2抗体包装100g
霉酚; 麦考酚（标准品）英文名称： Mildronate,Meldonium磷化分裂周期蛋白25C抗体包装25g
美(标准品)英文名称： Mildronate,Meldonium磷化周期依赖性激2抗体包装5g
美罗培南(标准品)英文名称： Carrageenan质膜微囊蛋白-3抗体包装25g
美洛西林钠(标准品)英文名称： Pranlukast3号染色体开放阅读框34抗体包装5g
美洛昔康（标准品）英文名称： Metoprolol tartrateCD134抗体包装1g
美索巴莫（标准品）英文名称： Metoprolol tartrate单核趋化蛋白5抗体包装5g
美他多辛（标准品）英文名称： Arabic gum髓鞘相关糖蛋白CD57抗体包装100g
优雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 质量规格：HPLC>98%,标准品色C-1试剂盒甜菊糖;Stevioside
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格：>98%,BR色b561试剂盒特女贞苷;Specnuezhenide
假单胞菌属Pseudomonas│sp. 质量规格：HPLC≥98%,标准品绒毛蛋白/埃兹蛋白试剂盒β-蜕皮激;Hydroxyecdyso
胶原酶IV型黄杆 3-羟基异恶唑-5-甲酸甲酯凝血因子ⅡaElisa
小孢根霉原变种 水合乙酸铽(III), REacton髓样分化蛋白2Elisa
中慢生根瘤 过氧化单硫酸盐五型腺病抗原Elisa
溜曲霉 4,6-二氨基-2-甲硫基嘧啶破伤风类IgG抗体Elisa
多孢木霉 氟化钒(IV)糖蛋白95Elisa
苏云金芽胞杆 三氟钒肝结合性表皮生长因子Elisa
臭曲霉 磷酸铋(III)脑红蛋白Elisa
小椭圆接合酵母 N,2-二甲基-3,3-二苯基-2-脂Elisa
歧皱青霉 2-巯基-4-氨基-6-羟基嘧啶抵抗样分子βElisa
叶球鞘氨单胞 3-硝基-4-羟乙氨苯旋毛虫抗体Elisa
谷氨酸棒杆 环基萘啶羧酸血小板反应蛋白2Elisa
干酪乳杆 2-基噻吩胰岛抗原2Elisa
假单胞属 异戊酸己酯抗甲状腺过氧化物抗体Elisa
微球 硫酸铕(III)十水合物, REacton甲状腺球蛋白抗体Elisa
苏云金芽孢杆松蠋亚种 硝酸镝(III) 水合物抗磷脂抗体Elisa
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