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详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit | 100T | 1～3天 |
商品介绍：
细胞凋亡时产生显著的变化是染色体固缩，DNA 裂解使细胞核形态产发生变化。本试剂盒提供的荧光染料Hoechst 33258 是一种无毒、水溶性双苯咪唑类化合物，可作为荧光探针与DNA 分子结合。 在凋亡细胞中，细胞膜对Hoechst 33258 的摄取增高，并且由于染色体高度浓缩，Hoechst 33258 与之结合增强，染色呈强蓝色荧光，而正常细胞只呈微弱荧光，死细胞则不被染色，由此可检测出凋亡。 操作方法 1. 用适当的方法诱导细胞凋亡； 2. 用冷Buffer A 洗涤细胞二次，离心收集106 细胞于1.5mL 微量离心管中；（贴壁细胞原位固定染色） 3. 加入1mL 的4%溶液(用户自备)，4℃固定细胞10min； 4. 离心去固定液，用Buffer A 洗两遍；离心后留50～100μL Buffer A 重悬细胞； 5. 取上步骤50～100μL 细胞悬液涂片，自然晾干； 6. 滴加100μL Hoechst 33258 工作液（备注1），室温染色10 min，水冲净晾干； 7. 以紫外光340nm 波长激发，荧光显微镜下观察。 储存：2-8℃，避光，有效期一年。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
川射干（标准品）英文名称： 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide磷化粘着斑激抗体包装1g
川乌（标准品）英文名称： 4-Nitrobenzyl alcohol磷化粘着斑激抗体包装25g
川西獐牙菜（标准品）英文名称： 4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green下颌发育不良综合征相关蛋白FAKD3抗体包装5g
川芎（标准品）英文名称： 5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedioneFAM134B蛋白抗体包装25g
川芎(标准品)英文名称： 5-Fluorocytidine磷化范可尼贫血组蛋白A抗体包装5g
川续断皂苷VI（标准品）英文名称： 5-Methylindole范可尼综合征相关蛋白FANCC抗体包装100g
川续断皂苷乙（标准品）英文名称： 5-NitroguaiacolFXYD离子转运调节因子6抗体包装25g
穿山（标准品）英文名称： 6-Bromo-2-naphtholFyn结合蛋白抗体包装5g
穿山龙（标准品）英文名称： 6-Dimethylallylamino purine riboside锌指蛋白FYCO1抗体包装100g
（标准品）英文名称： 6-MethylcoumarinFYTTD1蛋白抗体包装25g
内酯（标准品）英文名称： 7-Aminocephalosporanic acidRNA结合蛋白9抗体包装5g
船形乌头（标准品）英文名称： 8-Hydroxyquinaldine岩藻糖转移11抗体包装1g
垂盆草（标准品）英文名称： 9,10-Dibromoanthracene干扰诱导蛋白15抗体包装25g
椿皮（标准品）英文名称： 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl) fluorineP38相互作用蛋白抗体包装5g
慈溪麦冬皂苷A英文名称： Acid blue 29钙粘样蛋白28抗体包装1g
鲍曼不动杆菌Acinetobacter│baunannii 质量规格：进分,97%,一肾上腺髓质前体试剂盒去氢钩藤碱;Corynoxeine
16930=LMG22726资源名称: 羽扇豆苍白杆菌 质量规格：UV法含量测定；一物肾上腺髓质试剂盒3-氢化去氢松苓;Dehydrotra
: ATCC9642CBS246.65CMI91855IFO6342NRRL3536资源名称: 黑曲霉 质量规格：纯度≥98%,BR肾上腺能a1A受体试剂盒羟基酪;3,4-Dihydroxyph
Hoechst33258染色试剂盒酿酒酵母 3-氨基-2,6-二酮盐酸盐肠道病71型IgM抗体Elisa
大肠埃希氏 对氟肉桂核转录因子p52Elisa
Acinetobacter toroneri 4-氟肉桂COL12A1Elisa
蜡状芽孢杆 辛基缩水甘油布鲁氏杆抗体Elisa
瓜类炭疽盘孢* 2,5-二叔丁基-1,糖化铁蛋白Elisa
湘坪链霉 4-氯-3-氟抗核糖体抗体Elisa
盐地杆 2,5-二甲氧苯PL7抗体；抗苏氨酰tRNA合成Elisa
胡椒枯萎病 异烟酸甲酯外信号调节激Elisa
短小芽孢杆 2-吡啶甲酸甲酯γ氨基丁酸A型受体Elisa
嗜盐噬冷 富马酸单乙酯Ⅷ型胶原α2Elisa
薛瓦酵母 1,3-二氧杂环己烷-2-酮抗膜DNA抗体Elisa
小孢拟盘多毛孢 月桂酸锌抗着丝点抗体Elisa
水稻节杆 2-氟-5-氯吡啶-3-甲抗α-胞衬蛋白抗体IgG；IgAElisa
胶孢 异尿酸三缩水甘油酯Abl交互子3Elisa
酿酒酵母 炔基肿瘤坏死因子受体γElisa
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