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详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Collagenase III | 100mg | 1～3天 |
商品介绍：
本品为III型胶原酶，≥100 U/mg solid，常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。 本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维?；购衅渌囊恍┑鞍酌?、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。 胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。 目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向： 1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备； 2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备； 3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备； 4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。 分子量：68-130 kDa 激活剂：Ca2+、Zn2+ 抑制剂：EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum 活力单位：在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1μM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。 储存条件：4℃避光，有效期两年 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
洛莫司?。ū曜计罚┯⑽拿疲?/span> Adenosine-5'-diphosphate disodium salt(ADPna)CD8抗体包装1g
洛匹那韦（标准品）英文名称： Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP表面趋化因子受体2抗体包装100g
洛索洛芬钠（标准品）英文名称： Saxagliptin monohydrate胱抑B/半胱蛋白抑制剂B抗体包装25g
麻保沙星;马波沙星(标准品)英文名称： Ganciclovir趋化样蛋白抗体包装5g
马来地平（标准品）英文名称： Ganciclovir角蛋白20抗体包装100g
马来吡汀(标准品)英文名称： 5,6-Dimethoxy-1-indanone钙激活的中性蛋白2抗体包装25g
马来伏沙明（标准品）英文名称： PaeoniflorinCD45RO抗体包装100g
马来桂哌齐特(标准品)英文名称： Paeoniflorin嗜中性粒抗原CD177抗体包装25g
马来那敏/扑尔敏(标准品)英文名称： Paeoniflorin钙整合结合蛋白1抗体包装5g
马来曲美布?。ū曜计罚┯⑽拿疲?/span> Paeoniflorin21号染色体开放阅读框7抗体包装100g
马来噻吗洛尔（标准品）英文名称： Paeoniflorin磷化巨噬集落激因子受体抗体包装25g
马来替加色罗（标准品）英文名称： 5-Hydroxytryptophan磷化巨噬集落激因子受体抗体包装5g
马来溴那敏(标准品)英文名称： 5-HTP磷化巨噬集落激因子受体抗体包装1g
马来依那普利（标准品）英文名称： Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受体抗体包装5g
吗多明（标准品）英文名称： Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受体抗体包装25g
小单孢菌Micromonospora│sp. 质量规格：>98.5%,USP色c氧化亚基5A,线粒体试剂盒土荆皮乙;Pseudolaric Ac
马尔他布鲁氏菌 生物Ⅰ型Brucella│melitensis BiovarⅠ 质量规格：HPLC>99%,标准品色c氧化Ⅵα亚基多肽1试剂盒塔拉萨敏;Talatisamine
LMG27494T=CGMCC1.12516T资源名称: 芽孢八叠球菌 质量规格：>98%,BR,可用于培养色C氧化试剂盒天麻;Gastrodin
胶原酶III型酿酒酵母 溴化吡斯的明肺炎衣原体IgA抗体Elisa
灵芝 3-羟基二苯基结核抗体Elisa
污水水微 3-甲氧基二苯血小板膜表面相关抗体IgGElisa
丰加链霉灰白亚种 盐酸米那普仑周期蛋白依赖性激2Elisa
异配囊接霉 1-(2-氟苯基)哌周期依赖性激4Elisa
短芽孢杆 5-甲基色盐酸盐周期依赖性激5Elisa
金针菇 N,N-二苄基乙周期蛋白依赖性激2Elisa
解脂盐红 1,2-二溴-3,5-二氟苯周期依赖性激4Elisa
鸭疫里氏杆 四水合磷酸铬(III)周期依赖性激5Elisa
南类芽孢杆 氧氟沙星羧酸周期依赖性激11Elisa
猬木霉 1,4-二乙酰基苯表皮生长因子受体Ⅲ型突变体Elisa
溶血不动杆基因型4 1-(4-吡啶基)哌白介6受体αElisa
贝伦格葡萄座腔 2-甲氧基-4-甲基吡啶超敏肌钙蛋白IElisa
鸭疫里氏杆 1-甲基-3-氯-4-甲氧羰基吡唑-5-磺酰氧鲨烯环化Elisa
抗生链霉 5-氯-2-并噻唑氨基端前脑钠Elisa
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