詳細(xì)介紹
人源NK原代細(xì)胞
英文名稱 | Human Natural killer Cells | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
包裝 | 瓶裝 | 組織來源 | 外周血 |
貨號(hào) | GOY-01X1192 | 細(xì)胞形態(tài) | 短梭形 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 短梭形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
人NK細(xì)胞分離自人外周血單個(gè)核細(xì)胞;NK細(xì)胞即自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell,NK)是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞,不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān),而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生,能夠識(shí)別靶細(xì)胞、殺傷介質(zhì)。NK細(xì)胞來源于骨髓淋巴樣干細(xì)胞,其分化、發(fā)育依賴于骨髓及胸腺微環(huán)境,主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴結(jié)。NK細(xì)胞不同于T、B細(xì)胞,是一類無需預(yù)先致敏就能非特異性殺傷腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的淋巴細(xì)胞。由于NK細(xì)胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細(xì)胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細(xì)胞的殺傷活性呈正相關(guān)。NK細(xì)胞作用于靶細(xì)胞后殺傷作用出現(xiàn)早,在體外1小時(shí)、體內(nèi)4小時(shí)即可見到殺傷效應(yīng)。NK細(xì)胞的靶細(xì)胞主要有某些腫瘤細(xì)胞(包括部分細(xì)胞系)、病毒感染細(xì)胞、某些自身組織細(xì)胞(如血細(xì)胞)、寄生蟲等,因此NK細(xì)胞是機(jī)體抗腫瘤、抗感染的重要免疫因素,也參與第Ⅱ型超敏反應(yīng)和移植物抗宿主反應(yīng)。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血NK細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心、差速貼壁、細(xì)胞因子誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人源NK細(xì)胞經(jīng)CD56免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))
1、取出細(xì)胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3、細(xì)胞傳代:
1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細(xì)胞一次。
2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,37℃消化 3min 左右;顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入培養(yǎng)液終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。
Promocell C-25020 Hepatocyte Maienance Medium, 肝細(xì)胞維持培養(yǎng)液 500ml MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人細(xì)胞裂解液 CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 兔原代脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 兔原代甲狀腺上皮細(xì)胞
Caspase-6 (CT 0.5mgCaspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)
FABP3 Protein Human 重組人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白
TIMD4重組小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 Protein
CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白
FAM3B重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶16(MMP16)試劑盒 ,英文名: MMP16 ELISA Kit
Mouse histone H2b (histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒
Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 大鼠原激活肽(TAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforF1+2(Humanprothrombinfragme1+2)ELISAkit人原片段F1+2
細(xì)胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量試劑盒20次
Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 96T/48T
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)試劑盒 96T/48T
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T
兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒 96T/48T
人源NK原代細(xì)胞小鼠神經(jīng)降壓肽()試劑盒 96T/48T
Human membrane attack complex (MAC) ELISA Kit 人膜攻擊復(fù)合物(MAC)試劑盒
HumanHighdensitylipoproteincholesterol,HDL-CELISAKit 人高密度脂蛋白(HDL-C)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GoatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRP試劑盒山羊生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母堿性焦0酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法定量試劑盒20次
MousecoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit小鼠Ⅹ(FⅩ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FCGR1重組大鼠 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
HIV-1(human immunodeficiency virus type 1 0.5mgHIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)
SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白