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详细介绍
商品介绍：
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-6 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-6 为关键分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-6 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-6 裂解相应的胞浆胞核底物，导致细胞凋亡。Caspase-6荧光检测试剂盒就是将Caspase-6 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-6 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。 注意事项 1. Caspase-6 Substrate 避光保存及使用。 2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-6 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-6 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。 3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求，因为Caspase-6 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。 |
产品属性：
英文名称：Caspase-6 Fluorescence Metric Assay
产品规格：20T|50T|100T
发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大??；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
胞内离子通道蛋白1(CLIC1)英文名称：CLIC1 ELISA Kit粘附分子IgG样结构域蛋白1抗体包装500g
胞浆型磷脂A2(cPLA2)英文名称：cPLA2 ELISA Kit卡尔曼综合症基因1抗体包装100mg
半乳糖凝集-3(Gal-3)英文名称：Gal-3 ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族7抗体包装1g
半乳糖6硫酯(Gal-6S)英文名称：Gal-6S ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族17抗体包装1g
半胱天冬蛋白(caspase-3)英文名称：caspase-3 ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族12抗体包装5g
半胱蛋白抑制剂/胱抑C(Cys-C)英文名称：Cys-C ELISA Kit钠ATP通道蛋白抗体包装1g
百白破抗体(DPT)英文名称：DPT ELISA KitAGXT2L2蛋白抗体包装25g
白血病抑制因子受体(LIFR)英文名称：LIFR ELISA Kitβ淀粉样蛋白胞内结构域相关蛋白1抗体包装5g
白血病抑制因子(LIF)英文名称：LIF ELISA Kit锚蛋白重复及SAM结构域蛋白6抗体包装1g
白细胞活化黏附因子(ALCAM)英文名称：ALCAM ELISA Kit二磷腺苷核糖基转移3抗体包装250mg
白三烯E4(LTE4)英文名称：LTE4 ELISA Kit二磷腺苷核糖基转移5抗体包装1g
白三烯D4(LTD4)英文名称：LTD4 ELISA Kit腺苷单磷脱1抗体包装5g
白三烯C4(LTC4)英文名称：LTC4 ELISA Kit红蛋白Ank1抗体包装1g
白三烯B4(LTB4)英文名称：LTB4 ELISA Kit腺苷琥珀裂解抗体包装100g
白介9(IL-9)英文名称：IL-9 ELISA Kitα1B糖蛋白抗体包装25g
血管紧张原抗体骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一种ATP-竞争性的 Aurora kinase 抑制剂，作用于 Aurora A，Aurora B 和 Aurora C，IC50 分别
Caspase 6荧光法检测试剂盒(AFC)土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯结合珠蛋白检测试剂盒
胶孢 二氢猕猴桃内酯结核杆IgG抗体检测试剂盒
传染性支气管炎病 3,4-二氟苯-1,2-二睫状神经营养因子检测试剂盒
根霉属的 4-氯异喹啉解脲脲原体抗体检测试剂盒
猴头 2-氯甲基-3-甲基-4-(3-甲氧氧基)吡啶盐酸盐解整合素样金属蛋白酶12检测试剂盒
色褐链霉 盐酸去甲苯福林解整合素样金属蛋白酶33检测试剂盒
*美味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合素样金属蛋白酶9检测试剂盒
香菇 4，5-二溴-1H-1，2，3-三氮唑金黄色葡萄球肠素检测试剂盒
鲁氏毛霉 1-甲巯基环基乙酸甲酯金黄色葡萄球肠素A检测试剂盒
纠缠青霉 1-羟甲基环基乙金黄色葡萄球蛋白A检测试剂盒
腐皮镰孢 四氟酸亚铁(II)金葡肠素检测试剂盒
阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金属硫蛋白检测试剂盒
淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金属肽酶含血小板反应蛋白1检测试剂盒
玫红假裸囊 5-氨基-1,2,4-噻二唑盐酸盐金属肽酶含血小板反应蛋白5检测试剂盒
乳酒假丝酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯紧密连接蛋白检测试剂盒
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