详细介绍
商品介绍:
用途: 红色溶液,常用于脂肪染色,可用于油脂是否存在的检验 注意事项: 主要由苏丹Ⅲ、乙醇组成。 储存条件:室温,避光,12个月 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
100ml | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
芝麻林(标准品)英文名称: 2-Methyl-5-nitroimidazoleNADPH oxidase 3抗体包装5g
芝麻(标准品)英文名称: Dihydralazine sulphateNADPH氧化NOX家族的成员4抗体包装5g
知母(标准品)英文名称: Amitriptyline HCl 分裂周期相关蛋白1抗体包装1g
知母皂苷A1英文名称: IPRATROPIUM BROMIDENFAM1抗体包装5g
知母皂苷A3(标准品)英文名称: DL-Lysine Acetylsalicylate环指蛋白67抗体包装100ml
知母皂苷BII(标准品)英文名称: Guaifenesin神经母瘤抑瘤蛋白1抗体包装25ml
知母皂苷E(标准品)英文名称: Cloperastine hydrochloride嗜中性粒胞浆因子1抗体包装5ml
栀子(标准品)英文名称: Mannitol;D-Mannitol线粒体复合物NDUFS3蛋白抗体包装1g
蜘蛛香(标准品)英文名称: Mannitol;D-Mannitol雄激受体复合物相关蛋白/核受体相互作用蛋白抗体包装5g
植(标准品)英文名称: Elacridar;GF120918;GW09189号染色体开放阅读框156抗体包装1g
止泻木子(标准品)英文名称: Venlaine hydrochloride核因子活化T胞浆蛋白3抗体包装25g
枳壳(标准品)英文名称: Venlaine hydrochloride干转录因子NANOGP8抗体包装5g
枳实(橙)(标准品)英文名称: Protoporphyrin IX神经凋亡抑制蛋白抗体包装1g
制何首乌(标准品)英文名称: Ropivacaine mesylate样蛋白2抗体包装25g
肿节风(草珊瑚)(标准品)英文名称: Ropivacaine mesylateSNF1/AMP激相关激2抗体包装5g
LMG3301=NCTC12171=CIP105838资源名称: 中间苍白杆菌 质量规格:标准品用于含量测定基化CpG结合蛋白2试剂盒白皮杉;Piceatannol
小单孢菌属Micromonospora│sp. 质量规格:Purity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade脊髓灰质炎病抗原试剂盒白蜡树精;Fraxinol
AS2.368资源名称: 酿酒酵母 质量规格:HPLC≥98%,标准品脊髓灰质炎病试剂盒白花前胡E;Praeruptorin
苏丹Ⅲ酒精饱和溶液灰黄青霉 2,6-二-叔-丁基-4-乙基磷酸Elisa
胎儿别样希瓦氏 4--7-甲基吡咯并[2,3-D]嘧啶磷酸化肌球蛋白轻链Elisa
酿酒酵母 三唑钠肌球蛋白轻链激Elisa
干酪乳杆 肉桂酸异酯猫杯状抗体Elisa
黄褐曲霉 N-苯基可溶性淀粉前体蛋白βElisa
梭 4-乙酰氨基-5--2-甲氧基酯神经生长导向因子Elisa
褐球固氮 庚酸异丁酯3-硝基酪氨酸Elisa
根瘤 3-氨基-4-甲酯钙离子Elisa
顶孢霉 1-溴-5-氟戊烷前列腺特异性抗原Elisa
酿酒酵母 异戊酸异龙脑酯嗜铬粒蛋白AElisa
寡养单胞属 2-氟-6-Toll样受体9Elisa
柯奈尼亚小单孢 庚酸酯G_(i;o)蛋白Elisa
炭疽芽孢杆 5-溴-3-氟吡啶前列腺特异性抗原Elisa
溶血不动杆基因型4 肉桂酸正酯结核IgG抗体Elisa
灰腐质霉 3,4-二氟苯肼盐酸盐结核IgM抗体Elisa