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详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
产品属性：
英文名称：Caspase-2 Fluorescence Metric Assay
产品规格：20T|50T|100T
发货周期：1～3天
商品介绍：
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-2 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-2 为关键的执行分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-2 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-2 由两个大亚基和两个小亚基组成，裂解相应的胞浆胞核底物，终导致细胞凋亡。Caspase-2 荧光检测试剂盒就是将Caspase-2 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-2 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。 注意事项 1. Caspase-2 Substrate 避光保存及使用。 2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-2 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-2 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。 3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求，因为Caspase-2 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。 |
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
大内皮(Big ET)英文名称：Big ET ELISA Kit溶血磷脂?；艱抗体包装1g
大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)英文名称：Acta2/Actsa/Actvs ELISA Kit载脂蛋白E3抗体包装250mg
催乳抑制激(PIH)英文名称：PIH ELISA KitABI基因家族2抗体包装1g
催乳释放激(PRH)英文名称：PRH ELISA Kit氧化蛋白质解包装5g
催乳(PRL)英文名称：PRL ELISA Kit铁调节蛋白2抗体包装500mg
催产(OT)英文名称：OT ELISA Kit乙脱氢1型抗体包装50mg
促有丝分裂因子(MF/MPF)英文名称：MF/MPF ELISA KitAFP4a蛋白抗体包装1g
促性腺激释放激(GnRH)英文名称：GnRH ELISA KitRho GTP激活蛋白32抗体包装250mg
促生长激释放激(GHRH)英文名称：GHRH ELISA Kit能量平衡相关蛋白抗体包装5g
促肾上腺皮质激释放因子(CRF)英文名称：CRF ELISA Kit禽脑脊髓炎病AEV抗体包装5mg
促肾上腺皮质激(ACTH)英文名称：ACTH ELISA Kit腺苷环化7抗体包装25g
促肾上皮质激释放激(CRH)英文名称：CRH ELISA Kit腺苷环化4抗体包装5g
促卵泡(FSH)英文名称：FSH ELISA Kit腺苷活化蛋白激γ1抗体包装1g
促状腺释放激(TRH)英文名称：TRH ELISA Kit芳香N-乙?；瓶固灏?g
促状腺(TSH)英文名称：TSH ELISA Kit腺苷环化8抗体包装1g
三磷腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体结缔组织生长因子(CTGF)AR-A014418 is an ATP-competitive, and selective GSK3β inhibitor with IC50 and Ki
Caspase 2荧光法检测试剂盒(AFC)丁香假单胞 4-羟基-6-氯喹唑啉基质金属蛋白酶8检测试剂盒
异常威克汉姆酵母 6--4-羟基喹唑啉基质金属蛋白酶9检测试剂盒
假交替单胞属 2-甲氧基-3-硝基-4-甲基吡啶基质金属蛋白酶抑制因子1检测试剂盒
栖土曲霉 1-乙酰-4-基质金属蛋白酶抑制因子2检测试剂盒
蜥蜴纤细芽孢杆 2-(1H-吡唑-1-基)乙酸基质金属蛋白酶抑制因子3检测试剂盒
酿酒酵母 5-氯-6-甲基尿嘧啶基质裂解蛋白;基质溶素检测试剂盒
*樱桃链格孢 1-(3-甲氧基苯基)哌基质裂解素检测试剂盒
金龟子绿僵 N,N-二甲基1,4-丁烷二基质衍生因子1检测试剂盒
酿酒酵母 4-甲基-2-戊基-1,3-二氧戊环基质衍生因子1α检测试剂盒
Sphingobium rhizovicinum 2-氯-5-甲氧基苯并咪唑基质衍生因子1β检测试剂盒
大肠埃希氏 3,4-二甲氧基甲酯基质相互作用分子1检测试剂盒
小孢拟盘多毛孢 N-Boc-4-亚甲基激活素A检测试剂盒
盘长孢状盘孢 2'-F-Ac-dC亚磷酰单体敏感性脂肪酶检测试剂盒
玫烟色棒束孢 N-乙?；?5'-O-[双(4-甲氧基苯基)苯基]-2'-脱氧-2'-氟胞苷激肽释放酶10检测试剂盒
猪链球分型血清参考品 血清型 SS3 3-氟-2-甲基吡啶激肽释放酶11检测试剂盒
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