详细介绍
商品介绍:
WST-1 是广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂。WST-1 是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。WST-1是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT 类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。 首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan 不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-1和XTT、MTS产生的formazan 都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-1产生的formazan 比XTT和MTS产生的formazan 更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS 更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,线性范围更宽,灵敏度更高??梢杂糜谙赴蜃拥扔盏嫉南赴鲋臣觳?,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测等。WST-1 使用时无须同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外步骤去溶解formazan。WST-1对细胞无明显毒性。加入WST-1 显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到佳测定时间。 储存条件:2-8℃避光保存。 注意: 1.WST-1短期存放于2-8℃,长期存放请分装后-20℃避光保存。 2.避免反复冻融。 3.冻存后溶解时注意重新混匀。 有效期:一年。 |
产品属性:
中文名称:WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
英文名称:
产品规格:250T|500T|1000T
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
Drospirenone(标准品)英文名称: Tigecycline整合αM/巨噬表面分子抗体包装10g
Dutasteride(标准品)英文名称: Tigecycline血小板内皮黏附分子-1抗体包装50g
Epinephrine hydrochloride(标...英文名称: Tilmicosin血小板内皮黏附分子1抗体包装1g
Estradiol Benzoate(标准品)英文名称: TilmicosinCD34抗体包装25MG
Estradiol Cypionate(标准品)英文名称: Timolol MaleateCD36抗体包装100ml
Estradiol Enanthate(标准品)英文名称: Timolol Maleate凋亡加强结构域蛋白6抗体包装25ml
Estradiol Valeate(标准品)英文名称: Tinidazole凋亡加强结构域蛋白17抗体包装5g
Estriol(标准品)英文名称: Tinidazole凋亡加强结构域蛋白4抗体包装25g
Estrone(标准品)英文名称: Tobramycin Base4号染色体开放阅读框34抗体包装5g
Ethiny Estradiol(标准品)英文名称: Tobramycin Base酪蛋白激1γ3/CKI γ3抗体包装25g
Ethisterone(标准品)英文名称: Tobramycin Sulfate凋亡加强结构域蛋白9抗体包装5g
Etoposide(标准品)英文名称: Tobramycin Sulfate胆固氧化抗体包装250mg
Fasudil hydrochloride(标准品)英文名称: Tolnaftate半胱蛋白蛋白14抗体包装1g
Fenofibrate(标准品)英文名称: Topotecan HCl半胱蛋白蛋白5抗体包装5g
Fenofibric acid(标准品)英文名称: Topotecan HCl猪瘟病抗体包装1g
: Z332资源名称: 伤寒沙门氏菌 质量规格:≥98%,BR血栓A2试剂盒g莶精;Darutigenol
曲霉Aspergillus│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品血栓前体蛋白试剂盒β-细辛脑;β-Asarone
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 质量规格:≥99.0% ,合物血清淀粉样蛋白P试剂盒a-细辛;a-Asarone
WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒土库曼盐土生古 7-溴-1-氯异喹啉半胱氨酸蛋白3Elisa
皱孢链霉 4-吗啉基苄S转移π1Elisa
枯草芽孢杆枯草亚种 2-乙?;?5-溴吡啶S转移π1Elisa
酿酒酵母 3--4-硝基茴香蛋白激RElisa
发酵乳杆 2-氯-4-甲可溶性EPO受体Elisa
德沃斯氏 3-氯-4-甲肝脏甘油三脂脂肪Elisa
枯草芽孢杆 4-溴-2-氟苯磺酰结核分枝杆Elisa
产色链霉 3-基-4-氟苯酸膜联蛋白-A3Elisa
大肠埃希氏杆 3-氨基-2-甲基酸水合物1-羟基芘Elisa
解淀粉芽孢杆 2-氨基-3-基-4,5-二甲基吡咯乙酰肝硫酸盐Elisa
小链霉 氯酞酸血管内皮生长因子抗体Elisa
米根霉 2-(十八氧基)乙梅螺旋体IgM抗体Elisa
大肠埃希 2-氨基-3-基-4,5-二甲基吡咯梅螺旋体Igg抗体Elisa
芽孢杆 氯酞酸信号传导子及转录激活子5Elisa
草色串孢 2-(十八氧基)乙磷酸化信号传导子及转录激活子5Elisa