详细介绍
商品介绍:
Z-IETD-FMK是一种高效可逆的caspase-8的小分子抑制剂??梢砸种朴蒀aspase 8激活导致的细胞凋亡。Z-IETD-FMK分子量为654.7。 Z-IETD-FMK采用进口高品质原料分装配制,浓度为5mM。本产品适用于需要用到Z-IETD-FMK的各种实验,请根据不同的实验需要进行配制和使用,具体请参考相关文献或实验指南。 储存条件:-20℃保存。 有效期:一年。 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
200μl | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Androstenedione(标准品)英文名称: Salcitonin Acetate(Salmon Calcitonin)1号染色体开放阅读框41抗体包装100ml
Argatroban(标准品)英文名称: Saracatinib(AZD0530)1号染色体开放阅读框144抗体包装500ml
Atipamezole HCl(标准品)英文名称: Secnidazole4号染色体开放阅读框3抗体包装1g
Atomoxetine HCl(标准品)英文名称: Secnidazole组织蛋白S抗体包装1g
Atorvastatin calcium(标准品)英文名称: Sequoyitol死亡诱导蛋白抗体包装5g
Bambuterol HCl(标准品)英文名称: Sermorelin Acetate前列腺雄激抑制信号蛋白1抗体包装1g
Beclomethasone Dipropionate...英文名称: Silver Sulfadiazine磷化心肌肌钙蛋白抗体包装5g
Betamethasone Valerate(标准品)英文名称: Silver Sulfadiazine脊髓灰质炎受体相关蛋白1抗体包装1g
Betamethasone(标准品)英文名称: Simvastatin19号染色体开放阅读框73抗体包装100g
Bimatoprost(标准品)英文名称: Simvastatin整合αM抗体Integrin αM包装500g
Bleomycin A5 Hydrochloride ...英文名称: Combretastatin A4 disodium phosphate (CA4P)轴突蛋白4/少突胶质抗体包装100g
Bortezomib(标准品)英文名称: Sisomicin Sulfate轴突相关CNTP2蛋白抗体(少突胶质)包装25g
Budesonide(标准品)英文名称: Sisomicin Sulfate酪蛋白激δ1抗体包装5g
Candesartan cilexetil(标准品)英文名称: Somatostatin Acetate活化白粘附分子抗体包装100g
Carbamazepine(标准品)英文名称: Streptozocin1号染色体开放阅读框191抗体包装25g
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 质量规格:纯度>99%血纤肽/纤维蛋白肽A试剂盒盐小檗;BerbaMine dihy
: HBUM82521资源名称: 金黑小单孢菌 质量规格:>95%,BR血纤蛋白原γ链试剂盒新西兰牡荆苷;Vicenin-2
木霉属Trichoderma│sp. 质量规格:效价测定血纤蛋白试剂盒缬草;Homobaldrinal
Caspase 8抑制剂副猪嗜血杆 3-溴-2,6-二氟甲苯成纤维特异蛋白1Elisa
意大利青霉 2,3-二氟-6-甲氧基苯甲分拣连接蛋白7Elisa
短芽孢杆 溴乙酰氯抗凝血Elisa
杏鲍菇 6-氨基糖精磷酸化糖皮质受体Elisa
鸭疫里氏杆 3-(4-甲氧苯基)-3-羰基酸甲酯蛋白磷酸1调控Elisa
林生地霉 1-苄基-4-甲瘦分泌型受体Elisa
水黏结杆 2-溴-3-酚游离蛋白SElisa
江西弯曲嗜酸 间氯甲酸叔丁酯总蛋白sElisa
Marisediminicola 己酸二乙氨基乙酯柠檬酸盐总蛋白sElisa
阿魏侧耳 亚异基二酸二甲酯血小板生成Elisa
太平洋大洋杆状 4-氯苯甲酰乙酸甲酯钙结合蛋白Elisa
猴假单胞 3,4-亚甲基二氧苄肼过氧化物1Elisa
弗雷德里克斯堡假单胞 2,4,6-三氟苯乙抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体Elisa
匍枝根霉 2,4-二甲基-3-吡咯羧酸乙酯血小板衍化生长因子CCElisa
皱褶假丝酵母 3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸乙酯C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4Elisa