详细介绍
产品属性:
英文名称:PF-04620110
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
商品介绍:
PF-04620110是甘油二酯?;泼?1(DGAT1)抑制剂,IC50为19nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:1109276-89-2 纯度:99.37% 分子式:C??H??N?O? 分子量:396.44 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
深凹杯伞基合成抗体Human TMEM35 ELISA Kit大鼠内脏脂肪特异性丝蛋白抑制剂(vaspin)免疫试剂盒
槐生多年卧孔菌高尔基体卷曲螺旋蛋白1抗体Human TMEFF2 ELISA Kit大鼠内源性糖皮质激(GC)免疫试剂盒
绿色木霉高尔基体卷曲螺旋蛋白2抗体Human TLK1 ELISA Kit大鼠内皮脂肪(EL)免疫试剂盒
鸭疫里氏杆菌戊二酰脱氢抗体Human ITIH1(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1) ELISA Kit大鼠内皮抑(ES)免疫试剂盒
皮壳青霉GTP环反馈调节蛋白抗体Human TLK2 ELISA Kit大鼠内皮型一氧化氮合成(eNOS/NOS3)免疫试剂盒
麦根腐平脐蠕孢绒毛膜特异性转录因子GCM2抗体Human TM7SF2 ELISA Kit大鼠内皮转换2(ECE2)免疫试剂盒
大肠杆菌广泛控制基合成1样蛋白1抗体Human TM7SF3 ELISA Kit大鼠内皮转换1(ECE1)免疫试剂盒
多主葡萄壳菌β1-6 N-乙?;咸烟亲?抗体Human TM9SF4 ELISA Kit大鼠内皮受体A(ETR-A)免疫试剂盒
耐寒短杆菌磷化G蛋白激活内向通道1抗体Human TINAGL1 ELISA Kit大鼠内皮1(ET-1)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌G蛋白偶联受体激相互作用蛋白2抗体Human TINAG ELISA Kit大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)免疫试剂盒
中间普氏菌间隙连接蛋白10抗体Human PZP(Pregnancy zone protein) ELISA Kit大鼠内(ET)免疫试剂盒
平田头菇3-1间隙连结蛋白46/白内障相关蛋白抗体Human TIP47 ELISA Kit大鼠母亲DPP同源物4(Smad 4)免疫试剂盒
镰雄腐霉间隙连结蛋白50/白内障相关蛋白抗体Human TIMM13 ELISA Kit大鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫试剂盒
米根霉间隙连结蛋白31.9抗体Human TIPIN ELISA Kit大鼠膜相关磷脂A2(PLA2G2A)免疫试剂盒
白地霉甘油激2抗体Human TJAP1 ELISA Kit大鼠膜联蛋白IV(ANX-IV)免疫试剂盒
黄发链霉菌β-半乳糖苷1/β-Gal/弹性蛋白受体1抗体Human TIMM17A ELISA Kit大鼠膜联蛋白I(ANX-I)免疫试剂盒
: HBUM84148资源名称: 链霉菌 质量规格:用于GC-HS,≥99.8%(GC)基原薯蓣皂苷
聚生壳菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 质量规格:农残级基橙皮苷
匍枝根霉原变种Rhizopus│stolonifer var. stolonifer 质量规格:99%,离子对色谱级木兰花碱
DGAT1抑制剂(PF-04620110)大叶紫珠(标准品)英文名称: Bromophenol red, sodium saltFAM153B蛋白抗体包装5g
大枣(标准品)英文名称: Butyl stearateFAM46C蛋白抗体包装25ml
大皂角(标准品)英文名称: C10E6舌癌耐药相关蛋白1包装1g
玳瑁(标准品)英文名称: C12E10FAM129B蛋白抗体包装5g
丹参(标准品)英文名称: C12E9微管动力调节蛋白2抗体包装1g
丹参(标准品)英文名称: Calcium chloride, anhydrousFAM50A蛋白抗体包装5g
丹参钠(标准品)英文名称: Calcium oxalate, monohydrateFAM113A蛋白抗体包装5mg
丹参IIA(标准品)英文名称: Calcium oxide (Lime) powderFAM150A蛋白抗体包装25ml
丹参IIA-磺钠(标准品)英文名称: Calcium oxide lumpFRMD8蛋白抗体包装5ml
丹参I(标准品)英文名称: Calcium phosphate, monobasic, monohydrateFGFR1癌基因伴侣蛋白抗体包装1g
丹酚A(标准品)英文名称: Calcium pyrophosphateFAM家族蛋白40A抗体包装5g
丹酚B(标准品)英文名称: Canada balsamFAM55D蛋白抗体包装1g
丹酚B二酯英文名称: Caprolactam组织激活过氧化活化增生受体γ蛋白抗体包装25g
丹酚C(标准品)英文名称: Carboxypeptidase YFAM21C蛋白抗体包装5g
丹酚D(标准品)英文名称: Castor oilFAM13C1蛋白抗体包装1g
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)