详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
YM-90709 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
YM-90709是一种新型拮抗剂,抑制IL-5与IL-5受体结合。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:163769-88-8 分子量:359.42 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
杀鲑气单胞菌钙粘蛋白14抗体Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狼疮抗凝抗体(IgG)免疫试剂盒
层出镰孢菌钙激活氯离子通道蛋白3抗体Human UNC5C(Netrin receptor UNC5C) ELISA Kit人抗兰尼碱受体钙释放通道抗体免疫试剂盒
大肠埃希氏菌CD200受体抗体Human SUSD2(Sushi domain-containing protein 2) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗体免疫试剂盒
Pseudomonas psychrotolerans弹性蛋白1抗体Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗体(IgM)免疫试剂盒
粗皮侧耳(平菇)干生长因子受体/表面分化抗原抗体Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗体(IgG)免疫试剂盒
秦氏蜜环菌CD99样蛋白2抗体Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)免疫试剂盒
球毛壳钙粘蛋白相关蛋白CTNNA3抗体Human COQ10A(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog A, mitochondrial) ELISA Kit人抗可溶性肝抗原抗体(SLA)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌紧密连接蛋白15抗体Human PIN1(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1) ELISA Kit人抗菌肽LL-37 免疫试剂盒
草本枝孢紧密连接蛋白12抗体Human CES5A(Carboxylesterase 5A) ELISA Kit人抗菌肽(CAMP)免疫试剂盒
洁小菇CHIC2蛋白抗体Human PARM1(Prostate androgen-regulated mucin-like protein 1) ELISA Kit人抗菌肽(Attacin)免疫试剂盒
杨奇青霉磷化周期检测点激1抗体Human LETMD1(LETM1 domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗体(IgM)免疫试剂盒
青色链霉菌磷化周期检测点激2抗体Human FAF2(FAS-associated factor 2) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗体(IgG)免疫试剂盒
短芽孢杆菌磷化周期检测点激2抗体Human SPINK7(Serine protease inhibitor Kazal-type 7) ELISA Kit人抗巨噬抗体(anti-macrophage Ab)免疫试剂盒
苍黄链霉菌磷化周期检测点激2抗体Human MTX3(Metaxin-3) ELISA Kit人抗性磷5b(TRACP-5b)免疫试剂盒
橄榄链霉菌磷化周期检测点激2抗体Human FAM151A(Protein FAM151A) ELISA Kit人抗抗体(AsAb)免疫试剂盒
E.coli DH5α λpir遗传性脉络膜缺乏症相关蛋白抗体Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗角蛋白丝聚集/丝集蛋白抗体(AFA)免疫试剂盒
杂色曲霉Aspergillus│versicolor 质量规格:碱指示剂Ⅰ型胶原C端肽试剂盒泽泻F
结核分枝杆菌Mycobacterium│tuberculosis 质量规格:CPⅠ型胶原试剂盒青蒿
假交替单胞菌Pseudoalteromonas│sp. 质量规格:0.981型1-磷鞘受体试剂盒黄芪中分离物
IL-5与IL-5受体结合抑制剂(YM-90709)缺血修饰白蛋白(IMA)检测试剂盒英文名称:IMA ELISA Kit丝抑制蛋白激C底物抗体包装1g
醛固(ALD)检测试剂盒英文名称:ALD ELISA Kit核突触蛋白α抗体包装5g
全段状旁腺(i-PTH)检测试剂盒英文名称:i-PTH ELISA Kit自噬相关蛋白4B抗体包装500g
去肾上腺(NE)检测试剂盒英文名称:NE ELISA Kit整合样金属蛋白与凝血1型-12抗体包装10MG
去肾上腺(NA)检测试剂盒英文名称:NA ELISA Kitα-辅肌动蛋白4(内参)抗体包装1g
趋化因子配体1(CCL1)检测试剂盒英文名称:CCL1 ELISA Kit碱性磷抗体包装250mg
趋化因子5(CCL5/RANTES)检测试剂盒英文名称:CCL5/RANTES ELISA KitAU1 tag标签抗体包装100g
趋化因子(fractalkine/CX3CL1)检测试剂盒英文名称:fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit脂肪增强结合蛋白1包装25g
趋化因子(FK)检测试剂盒英文名称:FK ELISA Kit蛋白激B包装5g
趋化因子(CC基序)配体2(MRC2)检测试剂盒英文名称:MRC2 ELISA Kit蛋白激B包装100g
羟脯(Hyp)检测试剂盒英文名称:Hyp ELISA Kit血管生成样蛋白2抗体包装25g
羟基戊二单?;乖?/span>(HMG-CoAR)检测试剂盒英文名称:HMG-CoAR ELISA Kit血管生成3/血管生成4抗体包装5g
羟基戊二单酰(HMG-CoA)检测试剂盒英文名称:HMG-CoA ELISA Kit膜粘连蛋白 I抗体包装100ml
前心钠肽(Pro-ANP)检测试剂盒英文名称:Pro-ANP ELISA Kit膜粘连蛋白 Ⅱ抗体包装500ml
前列腺特异性抗原(PSA)检测试剂盒英文名称:PSA ELISA Kit活化转录因子1抗体包装1g