尼氏染色液(甲基紫法)公司*的产品：Gax/FITC 荧光标记生长终止特异性同源盒因抗体IgG硝汞 AR,98.5%（剧品）
GCK/FITC 荧光标记抗葡萄糖激抗体IgGβ-巯 AR,99.0%（剧品）
GCN2/FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠蛋白激GCN2蛋白抗体IgG发烟硝 GR
Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN

产品属性：

中文名称：尼氏染色液(甲基紫法)

英文名称：

产品规格：2×50ml

发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研

商品介绍：

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

异佛司可林（标准品）英文名称： D-GALACTOSE 1-[2-(2-AZIDOETHOXY)ETHOXYETHYL]-2,3,4,6-TETRA-O-ACETATE型肝炎病非结构蛋白5A反式激活蛋白9抗体包装500g

异甘草苷（标准品）英文名称： Clemastine fumarateNoxa蛋白抗体包装1g

异甘草（标准品）英文名称： Clemastine fumarateP53诱导凋亡抑制蛋白抗体包装5g

异橄榄树脂英文名称： Ketotifen fumarate磷化酪激B抗体包装1g

异杠柳苷;杠柳苷元-3-O-β -葡萄糖（1-4）-...英文名称： 2-Oxohexamethylenimine磷化中心粒蛋白Nudel抗体包装250mg

异钩藤碱(标准品)英文名称： Benproperine phosphate磷化中心粒蛋白Nudel抗体包装100g

异荭草苷(标准品)英文名称： Minoxidil线粒体复合物NDUFS4蛋白抗体包装25g

异槲皮苷(标准品)英文名称： 7-Hydroxy-4-methylcoumarinNADH脱氢α家族8抗体包装500g

异黄腐英文名称： 7-Hydroxy-4-methylcoumarinNADH脱氢黄蛋白1抗体包装1g

异黄芪皂苷I(标准品)英文名称： Testosterone undecanoateNADH脱氢黄蛋白2抗体包装5g

异黄芪皂苷II(标准品)英文名称： DipyridamoleNADH氧化还原辅1抗体包装1g

异黄芪皂苷IV(标准品)英文名称： S-Carboxymethyl-L-cysteine膜内在蛋白NOD26抗体包装5g

异茴芹内酯(标准品)英文名称： Isosorbide dinitrate磷化谷受体2B抗体包装1g

异苦参英文名称： Laurocapram磷化谷受体2A+2B抗体包装5g

异类叶升麻苷；异毛蕊花糖苷（标准品）英文名称： Oxymetazoline hydrochloride高度相似的周期蛋白激NEK6抗体包装1g

黑曲霉Aspergillus│niger 质量规格：>98%,标准品碱性胎儿蛋白试剂盒次野鸢尾黄;Irisflorentin

黑木耳Auricularia│auricula 质量规格：>99%,盐盐碱性磷试剂盒穿琥宁;Kalii Dehydrogra

鼠李糖乳杆菌Lactobacillus│rhamnosus 质量规格：HPLC>98%,标准品碱性亮拉链转录因子ATF样蛋白试剂盒芒柄花;Formononetin
尼氏染色液(甲基紫法)枯草芽孢杆 三苯基化硫Elisa

隐花青鹅膏 苯磺酸甲酯一磷酸腺苷Elisa

艾高夫氏亮 独活酊一氧化氮Elisa

粗壮假丝酵母 丁香叶油一氧化氮合成Elisa

黄盖小脆柄菇 玫瑰草油一氧化氮合成1Elisa

芝麻专化型 1-BOC-4-氨基引唑胰蛋白Elisa

接骨木镰孢 3,5-二氟-4-(2,2,2-三氟乙氧基)胰岛Elisa

鸡伤寒沙门氏 液体石蜡胰岛降解Elisa

布氏白僵 N-甲基-N-亚硝基对甲苯磺酰胰岛样生长因子1Elisa

谢瓦氏曲霉 Boc-D-4-氨酸胰岛样生长因子2Elisa

苹果链格孢 缬草根提取物胰岛样因子5Elisa

酿酒酵母 肉豆蔻油胰岛原Elisa

阿布拉链霉 4,4'-二二苯基砜胰岛自身抗体Elisa

异样纤维单胞 5-氮杂-2-甲酸胰淀粉Elisa

瑞士乳杆 苯扎铵胰高血糖Elisa 

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)