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详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
DAPI solution,1mg/ml | 1ml | 1～3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍：
本产品为DAPI水溶液，浓度为1mg/ml。使用时根据实验不同直接将本产品用相应溶液稀释到工作浓度。 CAS号：28718-90-3 分子式：C16H15N5·2HCl 分子量：350.25 储存条件：?20℃避光保存，有效期至少2年 纯度：≥90% (HPLC和 TLC) DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚)是一种能够与DNA中大部分A，T碱基相互结合的荧光染料﹐常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时，大吸收波长为358nm，大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。 |
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
α-胞衬蛋白(SPTAN1)英文名称：SPTAN1 ELISA Kit钙连蛋白抗体包装500g
α白蛋白(AFM)英文名称：AFM ELISA Kit二氢嘧啶相关蛋白2抗体包装50mg
α2-纤溶抑制因子(α2PI)英文名称：α2PI ELISA Kit色P450ⅡE1抗体包装1g
α2-巨球蛋白(α2M)英文名称：α2M ELISA Kit趋化因子受体1抗体包装100g
α2-HS糖蛋白(αHSG)英文名称：αHSG ELISA Kit磷化原癌基因c-Raf抗体包装25g
α1-微球蛋白(α1M)英文名称：α1M ELISA Kit磷化致癌基因C-Myc抗体包装500g
α1-性糖蛋白(α1AGP)英文名称：α1AGP ELISA KitCD33抗体包装1g
α1-抗(α1AT)英文名称：α1AT ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗体包装5g
Zeste同源物增强子1(EZH1)英文名称：EZH1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗体包装1g
YY肽(PYY)英文名称：PYY ELISA Kit离子通道蛋白3抗体包装25g
X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)英文名称：XRCC6 ELISA Kit磷化周期E抗体包装5g
X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)英文名称：XRCC5 ELISA Kit磷化分裂周期蛋白25C抗体包装250mg
X-框结合蛋白1(XBP1)英文名称：XBP1 ELISA Kit磷化周期依赖性激9抗体包装1g
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)英文名称：WFS1 ELISA Kit磷化Connexin 43蛋白抗体包装5g
WNT1诱导信号通道蛋白1(WISP1)英文名称：WISP1 ELISA Kit丝切蛋白抗体包装100g
链霉菌Streptomyces│sp. 质量规格：纯度98%以上异质性胞核核糖核蛋白G试剂盒乙酰缬草三酯;Acevaltratum
链霉菌Streptomyces│sp. 质量规格：>99%,BR异质性胞核核糖核蛋白E试剂盒乙酰哈巴苷;8-O-Acetylharp
CGMCC1.5361=JCM14000资源名称: 黄微球菌 质量规格：含量测定异质性胞核核糖核蛋白D试剂盒异型南五味子丁;Heterocliti
DAPI溶液(1mg/ml)食淀粉乳杆 5-氟-2-甲酰基苯酸水痘-带状疱疹病IgM抗体Elisa
冷海水黄杆 4-溴甲基四氢吡喃Rho关联含卷曲螺旋蛋白激Elisa
球孢白僵 六基钴(II)铁(II)酸乙型肝炎病E抗体Elisa
枯草芽孢杆斯氏亚种 二（六氟锑酸）三乙（五甲基环戊二烯基）铑（III）乙型肝炎病核心抗体Elisa
秦氏蜜环 曲安西龙肝再生增强因子Elisa
嗜盐拟诺卡氏 C. I. 颜料红 49糖化血红蛋白A1cElisa
瘦弱盐扁平 2,3-二氟苯重组高迁移率族蛋白B1Elisa
相思根瘤 2-氟-4-单纯疱疹病2IgG抗体Elisa
美澳型核果褐腐病 2-溴-6-苯单纯疱疹病2IgM抗体Elisa
米曲霉 6-氟-2-吡啶磺酰单纯疱疹病6IgG抗体Elisa
白僵 2-甲氧基-3-氟-5-溴吡啶单纯疱疹病6IgM抗体Elisa
溶壁（lywallzyme） 3-溴-2-甲氧基-5-三氟甲基吡啶单纯疱疹病7IgG抗体Elisa
大肠埃希氏 Fmoc-Lys(5-FAM)-OH单纯疱疹病7IgM抗体Elisa
美澳型核果褐腐病 3-溴-5-EB病IgG抗体Elisa
大肠埃希 十八烷基二甲基叔EB病IgM抗体Elisa
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