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產(chǎn)品名稱：大鼠角膜成纖維原代細胞
英文名稱：Rat Corneal Fibroblast Cells
規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：GOY-01X1075
分類：大鼠原代細胞

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

大鼠角膜成纖維細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài)，合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠角膜成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠角膜成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

準備DMEM高糖，10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清。

1）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

2）凍存液：90%培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

2、細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血來源的人類CD14+單核細胞，單一來源，預(yù)選型 10 million 人結(jié)膜成纖維細胞HConF  KB(人口腔表皮樣癌細胞)     DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / MCK10 小鼠胰腺星狀細胞永生化細胞 大鼠原代腎小管上皮細胞

Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta 0.5mgInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受體-β(抗原)

FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白

IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白  Protein

SMPD1 Protein Mouse 重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 (His 標簽)

ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標簽) Protein

大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員3(W3)試劑盒 ，英文名： W3 ELISA Kit

Mouse leptin (LEP) ELISA Kit 小鼠瘦素(LEP)試劑盒

MousecomplemefactorH,CFHELISAKit 小鼠補體因子H(CFH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHSPgp96ELISAKit大鼠熱休克蛋白糖蛋白96

細胞NADH心肌黃酶活性染色試劑盒100次

ELISAKitIL-1大鼠白介素1

豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒   96T/48T

豚鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒   96T/48T

豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒   96T/48T

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒   96T/48T

大鼠角膜成纖維原代細胞小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)試劑盒

HumanEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanChlamydiaachomatis,CT試劑盒人沙眼衣原體抗體(CT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米TC1507品系試劑盒20次

HumansecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISAKit人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD53重組小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 標簽) Protein

基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)

CD81重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein

IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標簽)

EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

1、收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

3、用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4、請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的培養(yǎng)基。

5、建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和微生物菌種查詢網(wǎng)技術(shù)部溝通交流。

6、該細胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。