详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
产品属性:
中文名称:GSK-3α抑制剂(SB 415286)
英文名称:SB 415286
产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg
发货周期:1~3天
商品介绍:
SB415286是一种有效的GSK-3α抑制剂,IC50值为77.5nM,Ki值为30.75nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:264218-23-7 纯度:99.88% 分子式:C??H??ClN?O? 分子量:359.72 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
暗盖淡鹅膏菌GA结合蛋白转录因子α/GABP-α抗体Human TMEM16A/DOG1 ELISA Kit大鼠皮质(Cortisol)免疫试剂盒
巨大芽胞杆菌GA结合蛋白转录因子β/GABP-β1/GABP-β2抗体Human TMEM175 ELISA Kit大鼠牛血清白蛋白(BSA)抗体(IgG)免疫试剂盒
耐久肠球菌谷脱羧65+谷脱羧67抗体Human TMEM173(Transmembrane protein 173) ELISA Kit大鼠XIV(FXIV/protein C)免疫试剂盒
塔宾曲霉谷脱羧样蛋白1抗体Human TMEM176A ELISA Kit大鼠IX(FIX)免疫试剂盒
分枝节杆菌葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗体Human TMEM102 ELISA Kit大鼠Ⅻ(FⅫ)免疫试剂盒
浅天青链霉菌α葡萄糖苷/溶体α-葡糖苷抗体Human TMEM176B ELISA Kit大鼠ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫试剂盒
Sporosarcina生长因子受体结合蛋白2相关蛋白3抗体Human TMEM108 ELISA Kit大鼠Ⅹ(FⅩ)免疫试剂盒
盘长孢状盘孢生长因子受体结合蛋白2相关蛋白4抗体Human TMEM161A ELISA Kit大鼠Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒
浅白隐球酵母G基丁受体pi/GABAA Rπ抗体Human TMEM168 ELISA Kit大鼠凝血原片段F1+2(F1+2)免疫试剂盒
豌豆根瘤菌磷化G基丁B型受体2抗体Human TMEM165 ELISA Kit大鼠凝血受体(TR)免疫试剂盒
棉阿舒囊霉G蛋白偶联受体结合蛋白α11/Gα 11 抗体Human TMEM16A/DOG1 ELISA Kit大鼠凝血抗凝血复合物(TAT)免疫试剂盒
Lactobacillus brevisG3BP2蛋白抗体Human TLE1 ELISA Kit大鼠凝血抗凝血Ⅲ复合物(TAT-III)免疫试剂盒
柠檬色短小杆菌γ基丁运载蛋白2抗体Human TMEM173(Transmembrane protein 173) ELISA Kit大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)免疫试剂盒
游动放线菌*β1-6 N-乙?;咸烟亲?抗体Human ITIH1(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1) ELISA Kit大鼠凝聚(CLU)免疫试剂盒
格氏嗜盐碱杆菌β1-6 N-乙?;咸烟亲?抗体Human TM7SF3 ELISA Kit大鼠柠檬合(CS)免疫试剂盒
大肠埃希菌γ-微管蛋白GCP4抗体Human TM9SF4 ELISA Kit大鼠尿液三叶因子3(TFF-3)免疫试剂盒
栖珊瑚假交替单胞菌Pseudoalteromonas│paragorgicola 质量规格:分析标准品基莲心碱
贝伦格葡萄座腔菌Botryosphaeria│berengeriana De Not. 质量规格:分析标准品基酞
灰葡萄孢Botrytis│cinerea 质量规格:分析标准品桑皮苷C
GSK-3α抑制剂(SB 415286)楤木皂苷A英文名称: Amikacin成纤维生长因子受体2抗体包装1g
粗叶悬钩子甙英文名称: Aminophyllin hydrate成纤维生长因子受体4抗体包装5g
醋辛酯(标准品)英文名称: Ammonium bismuth citrate, hydrate凝血原(纤维介)抗体包装1g
大波斯菊苷,芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(标准...英文名称: Ammonium bromide衰老关键蛋白抗体包装25ml
大车前苷(标准品)英文名称: Ammonium iodide凋亡调节基因之一抗体包装5ml
大豆苷,黄豆苷 (标准品)英文名称: Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate凋亡调节基因之一抗体(短型)包装25ml
大豆,黄豆苷元(标准品)英文名称: Ammonium molybdate, tetrahydrate纤维连接蛋白抗体包装5ml
大风子(标准品)英文名称: Ammonium phosphomolybdate , hydrateFosB蛋白抗体包装250mg
大腹皮(标准品)英文名称: Ammonium sodium phosphateFRA2/FOSL2抗体包装1g
大果木姜子(标准品)英文名称: Ammonium succinate叉头蛋白P3抗体包装5g
大红袍(标准品)英文名称: Ammonium thiosulfate成纤维生长因子8抗体包装50mg
大黄(掌叶大黄)(标准品)英文名称: Amprolium hydrochloride肌动蛋白结合蛋白Fascin抗体包装25g
大黄(药用大黄)(标准品)英文名称: Antimony (III) oxide线粒体裂变1蛋白抗体包装5g
大黄酚(标准品)英文名称: Azomethine-H monosodium salt叉头蛋白P1抗体包装25g
大黄酚-8-O-葡萄糖苷(标准品)英文名称: Azure C鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原F1单克抗体包装5g