详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone | 100ul | 1~3天 |
商品介绍:
CCCP是一种质子载体(H+ ionophore),强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜,抑制光合作用;CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素氧化酶。 CAS号:555-60-2 分子式:C9H5ClN4 分子量:204.62 储存条件:-20℃保存 纯度:≥97% (TLC) CCCP还具有其他功能: 1)在牛蛙交感神经方面的实验表明,CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放; 2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性; 3)对细胞内钙水平的各种调节效应; 4)抑制脂肝酶的分泌; 5)部分抑制pH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。 本品是溶于DMSO的CCCP溶液,浓度为50mM,体积为100μl(相当于1mg的总量),常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-10(货号:J8050)来进行相关研究。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
白介15(IL15)英文名称:IL15 ELISA Kit1号染色体开放阅读框103抗体包装100g
白介13受体α2(IL13Rα2)英文名称:IL13Rα2 ELISA Kit儿茶酚O基移位抗体包装25g
白介13(IL13)英文名称:IL13 ELISA Kit补体C1qTNF9链多肽抗体包装5g
白介12B(IL12B)英文名称:IL12B ELISA Kit平滑肌钙调蛋白CNN2抗体包装1g
白介12A(IL12A)英文名称:IL12A ELISA Kit心肌病相关蛋白2包装5g
白介11受体α(IL11Rα)英文名称:IL11Rα ELISA Kit5号染色体开放阅读框34抗体包装100g
白介11(IL11)英文名称:IL11 ELISA KitE1A激活基因激蛋白1抗体包装25g
白介10(IL10)英文名称:IL10 ELISA Kit2号染色体开放阅读框42抗体包装5g
八聚体结合转录因子4(OCT4)英文名称:OCT4 ELISA Kit猪瘟病抗体包装1g
酰tRNA合成复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)英文名称:AIMP1 ELISA Kit3号染色体开放阅读框54抗体包装5g
基己糖苷Bβ(HEXβ)英文名称:HEXβ ELISA Kit2号染色体开放阅读框43抗体包装5g
基己糖苷Aα(HEXα)英文名称:HEXα ELISA Kit猪瘟病抗体包装5g
基端前心钠肽(NT-ProANP)英文名称:NT-ProANP ELISA Kit中心体蛋白110抗体包装1g
基端前脑钠(NT-ProBNP)英文名称:NT-ProBNP ELISA Kit纤维包装5g
阿黑皮原(POMC)英文名称:POMC ELISA Kit分裂周期蛋白14B抗体包装10ml
假单胞菌Pseudomonas│testosteroni 质量规格:>98.5%,BR,可用于培养异质性胞核核糖核蛋白M试剂盒盐葫芦巴碱;Trigonelline
金黄色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 质量规格:HPLC>97%,标准品异质性胞核核糖核蛋白L试剂盒盐石蒜碱;Lycorine hydro
疣孢青霉Penicillium│verruculosum 质量规格:>98%,进分,sigma E1383 异质性胞核核糖核蛋白L试剂盒雅姆皂苷元 ;yamogenin
CCCP细胞凋亡诱导剂(50mM)锈赤蜡黄链霉 1-苄氧羰基-3-羟基氮杂环丁烷喋呤抗体Elisa
慢生根瘤 2,4-二溴吡啶-3-甲胃动蛋白2抗体Elisa
酿酒酵母 3,4-双(二氟甲氧基)苯甲Ⅱ型胶原α1Elisa
泡盛曲霉 6-溴-7-氟喹啉无翅型MMTV整合位点家族成员1Elisa
马沙门氏 1-Boc-2-T因子Elisa
白黄马赛 1-二茂铁基乙尿肌酐Elisa
黄曲霉 2-氯-4-甲氧基苯青霉Elisa
芽孢杆 N,N-双(4-磺丁基)-3-链霉Elisa
布鲁塞尔德克酵母 2-基-4-氟甲酯庆大霉Elisa
食有机物深海芽孢杆 6-氯-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮相关抗原11AElisa
卡门柏青霉 3-氟-4-溴溴苄肝吸虫Elisa
Methylibium 基二茂铁全反钴II型Elisa
酿酒酵母 H-89 肝吸虫IgM抗体Elisa
毛栓孔 1-甲基-1H-吡唑-4-肝吸虫IgG抗体Elisa
类芽孢杆属 1-N-苄氧羰基哌-2-甲酸甲酯抗磷脂A2受体IgG抗体Elisa