详细介绍
操作流程:
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称:莫氏立克次体核酸检测试剂盒
规格:50T
货号:GOY-M6463
分类:核酸检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板??芍苯佑昧俅脖瓯救缪?、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PIRH2 泛素连接酶抗体 规格: 0.1ml*
AFAP/AFAP-110 微丝相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml*
TSARG3/TSARG1 生细胞凋亡相关基因3抗体 规格: 0.1ml*
GK5/Glycerokinase 5 甘油激酶5抗体 规格: 0.2ml*
NCF1 嗜中性粒细胞胞浆因子1抗体 规格: 0.2ml*
ERK1/2(p44/42 MAPK) 丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 规格: 0.1ml*
5-HTT 5-羟色胺转运蛋白抗体 0.1ml*
KATNA1/Katanin p60 A1 剑蛋白p60亚基A1抗体 规格: 0.2ml*
RSV 呼吸道合胞病毒抗体 规格: 0.1ml*
MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体 规格: 0.1ml*
Rabbit Anti-human sIgA/APC APC标记的兔抗人分泌型IgA 规格: 0.1ml*
SorLA/LRP9 低密度脂蛋白受体相关蛋白9抗体 规格: 0.2ml*
Ulex Europaeus Lectin 1/UEA1 荆豆凝集素1抗体 规格: 0.2ml*
C17orf104 17号染色体开放阅读框104抗体 规格: 0.2ml*
FNDC1 Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白1 规格: 0.2ml*
莫氏立克次体核酸检测试剂盒Veronal Buffered Saline VBS
人肌酸激酶(CK)ELISA Kit
大肠杆DH10Bac种
pFL39
小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA Kit
一步法质粒DNAout2.0(50次)
pcHis2 C(pcHis2C)
PIPES Lysis Buffer with iton,2X
人白介素-5(IL-5)ELISA Kit
Schlesneria paludicola medium
pEarleyGate 100(pEarleyGate100)
小鼠环孢素A(CsA)ELISA Kit
ФX174 RFⅠDNA
pRSF-2 Ek/LIC (linearized)(pRSF2EkLIC )
Casein-Tween-20 in PBS