大鼠卵泡膜原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠卵泡膜細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育（右側已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位于中央，由疏松結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和神經。哺乳動物的卵巢內卵泡的發(fā)育需要相關激素的調節(jié)才能完成，卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞，并轉變?yōu)榇萍に亍Ｒ虼?，卵泡膜細胞在生殖內分泌調節(jié)中占有關鍵的位置，了解其在病理及生理中的作用，對于與性激素有關的婦產科疾病（如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等）的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中，卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結構的完整性，參與構成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關報道，但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠卵泡膜細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠卵泡膜細胞經3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

HT-1080(人纖維肉瘤細胞)  LX-2, 人肝星形細胞株 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401  HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   HAVCR1 小鼠肺動脈平滑肌細胞永生化細胞 大鼠原代脾源性內皮祖細胞

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.1mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(1-39) 促腎上腺皮質激素(1-39)(抗原)

FCGR3B Protein Human 重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白

KIRREL3重組小鼠 KIRREL3 / NEPH2 蛋白 (His 標簽) Protein

IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

APOL1重組人 APOL1 / apolipoprotein L1 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠微粒體S轉移酶2(MGST2)試劑盒 ，英文名： MGST2 ELISA Kit

Niu Bingtong (acetone) ELISA kit for the detection 牛檢測(acetone)試劑盒

Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit 大鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHPV-IgG(HumanpapillomavirusIgG)ELISAKit人狀瘤病毒抗體IgG

細胞P38β2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitAβ1-40大鼠β淀粉樣蛋白1-40

小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠雌二醇受體(ER)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠卵泡膜原代細胞豚鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit

Human protein kinase A (PKA) ELISA Kit 人蛋白激酶A(PKA)試劑盒

MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBMP-6(MouseBonemorphogeneticprotein6)ELISAKit小鼠骨形成蛋白6

細菌氫鉍選擇瓊脂平板50個

rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit兔子神經特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒規(guī)格：96T/48T

ENTPD1重組小鼠 CD39 / ENTPD1 蛋白 Protein

成纖維細胞生長因子9(FGF9)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)

CD300LG重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白 Protein

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽)

SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (Fc 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。