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详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
产品属性：
中文名称：Hoechst33342染色试剂盒
英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
商品介绍：
Hoechst33342染色试剂盒可用于细胞凋亡检测，也可用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。Hoechst33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33342 能少许进入正常细胞膜，使其染上低蓝色，而凋亡细胞的膜通透性增强，因此进入凋亡细胞中的Hoechst 33342 比正常细胞的多，荧光强度要比正常细胞中要高，此外，凋亡细胞的染色体DNA的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA 结合，并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将Hoechst 33342 排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。Hoechst 33342的大激发波长为346nm，大发射波长为460nm；Hoechst 33342和双链DNA 结合后，大激发波长为350nm，大发射波长为461nm。 本Hoechst 33342染色试剂盒可直接用于活细胞或组织的细胞核染色，也可用于固定细胞或组织的细胞核染色。 储存条件：HO33342液-20℃避光保存。B液2-8℃保存。 有效期：一年。 |
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大??；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
乙阿比特龙酯英文名称： Dorzolamide HCl富含半胱C端蛋白1抗体包装5g
异环磷酰英文名称： Doxazosin MesylateE1A激活基因激蛋白2抗体包装1g
扎西他滨,2',3'-二脱氧胞苷英文名称： Doxazosin Mesylate壁合成蛋白43抗体包装5g
子囊霉英文名称： Doxorubicin HCl/Adriamycin19号染色体开放阅读框29抗体包装1g
紫杉英文名称： Doxorubicin HCl/Adriamycin磷化p21蛋白抗体包装250mg
左亚叶钙；酰四氢叶钙英文名称： Doxycycline HCl磷化周期检测点激2抗体包装25g
阿卡地新(AICAR)英文名称： Doxycycline HCl磷化钙/钙调依赖蛋白激2α抗体包装5g
阿利克仑半富马盐英文名称： Menadione磷化周期依赖性激2抗体包装100g
阿齐沙坦英文名称： Menadione磷化周期检测点激1抗体包装25g
阿昔莫司，阿西莫司英文名称： Econazole nitrate磷化P27抗体/周期依赖激抑制剂抗体包装25g
英文名称： Econazole nitrate磷化α-连环蛋白抗体包装5g
安倍生坦英文名称： Entecavir周期E2抗体包装5g
力农英文名称： Entecavir磷化钙/钙调依赖蛋白激CAMK2B/D/G抗体包装250mg
地平英文名称： Epalrestat 肿瘤易感候选基因3抗体包装100g
奥美沙坦；奥美沙坦英文名称： Epirubicin HCl磷化肿瘤易感候选基因3抗体包装25g
华癸中间根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 质量规格：>98%,BR胰岛淀粉样多肽试剂盒盐碱;Ephedrine hydr
CBS7227=IFO10179资源名称: 假白布勒酵母 质量规格：>95%脂溶性的原激活肽试剂盒原人参三;Protopanaxatri
栖热菌Thermus│sp. 质量规格：≥98%,BR原Ⅱ试剂盒原人参二;Protopanaxdiol
Hoechst33342染色试剂盒中国克鲁维酵母 6-氯水杨酸重组人脂肪因子Elisa
黄色短杆 N,N',N'',N''',N'''',N'''''-六-O-乙酰基壳六糖成纤维生长因子13Elisa
猴头 制霉药敏纸片补体C5转化Elisa
金黄壳囊孢 氨苄青霉药敏纸片特异性IgG抗体Elisa
贝雷丝孢酵母 异铝KI67抗原Elisa
球孢白僵 丁香连氮β肌动蛋白Elisa
总状毛霉 大孔树脂XDA-1β肌动蛋白Elisa
沼泽红假单胞 D-腺病抗体Elisa
大肠埃希氏 愈创木酚支原体Elisa
溶杆 邻苯二甲酸核因子κB抑制物激Elisa
串珠镰刀 羊毛脂总胆固Elisa
氧化微杆 双氯酚 白介13Elisa
核青霉 高效氯氟菊酯凝血Elisa
类芽孢杆 环沙星FAT4Elisa
明尼苏达被毛孢 邻苯二甲酸二癸酯高分子量脂联Elisa
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