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人正常組織來(lái)源細(xì)胞是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。

一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代，進(jìn)行細(xì)胞生命過(guò)程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問(wèn)題的研究。

那么關(guān)于原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng)，我們應(yīng)該怎么做呢？

一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代

1、吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。

2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。

3、消化2-5分鐘后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時(shí)，棄去消化液，加入培養(yǎng)液終止消化。

4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液，分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。

二、懸浮細(xì)胞的傳代

1、直接傳代

① 讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3。

② 用吸管吹打形成細(xì)胞懸液后，分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2、離心法傳代

① 將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，離心800-1000rpm，5分鐘。

② 去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，用吸管吹打使之形成細(xì)胞懸液。

③人正常組織來(lái)源細(xì)胞將細(xì)胞懸液分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
53-39-4     氧雄龍標(biāo)準(zhǔn)品    Oxandrolone CIII    50mg
53-36-1     甲潑尼龍醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品    Methylprednisolone Acetate     200mg
5333-42-6     辛基十二烷醇標(biāo)準(zhǔn)品    Octyldodecanol     200mg
532-76-3     鹽酸海克卡因標(biāo)準(zhǔn)品    Hexylcaine Hydrochloride    1g
532-32-1     苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品    Sodium Benzoate     1g
532-03-6     美索巴莫標(biāo)準(zhǔn)品    Methocarbamol     200mg
53-19-0     米托擔(dān)標(biāo)準(zhǔn)品    Mitotane    500mg
53-16-7    雌酚酮標(biāo)準(zhǔn)品    Estrone    200mg
530-43-8    氯霉素A多晶型標(biāo)準(zhǔn)品        100mg
530-43-8    無(wú)味氯霉素A晶型標(biāo)準(zhǔn)品        200mg
530-43-8    氯霉素棕櫚酸酯標(biāo)準(zhǔn)品    Chloramphenicol Palmitate    200mg
人正常組織來(lái)源細(xì)胞