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公司動態(tài)

細胞接收后的操作流程與注意事項

閱讀:2442          發(fā)布時間:2017-3-27

轉(zhuǎn)化細胞接收后的操作流程與注意事項
1. 您收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng),切勿再次低溫凍存;若尚留有干冰,請立即將含有細胞的凍存管放入液氮中保存待用,并按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
2. 請您在接收細胞后的4周內(nèi)及時做復蘇培養(yǎng),以確認細胞活力、狀態(tài)并保種。逾期恕不受理售后問題,謝謝合作!
3. BNCC凍存細胞采用優(yōu)化配比的細胞凍存液,無需離心,細胞解凍后直接將250 ul細胞懸液滴入裝有8-10 ml*培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。
貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵守無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶進行消化(注意把握消化時間,通??刂圃?~2min);
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小時去掉胰酶,加6~8 ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落、吹散;
3. 取出部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液,待轉(zhuǎn)化細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者凍存。
懸浮細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵守無菌操作)
1. 懸浮細胞常規(guī)傳代操作為半量換液,分瓶傳代,即取出一半細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);也可根據(jù)細胞密度分多瓶傳代。
2. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液,待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。
半貼壁半懸浮細胞培養(yǎng)注意事項(請嚴格遵守無菌操作)
1. 若懸浮細胞較多且折光率良好,可離心收集,繼續(xù)培養(yǎng)。
2. 若有少量細胞懸浮,也可不用收集,傳代操作按常規(guī)貼壁細胞操作流程處理。
3. 若懸浮細胞較多,離心收集,原瓶中貼壁細胞按照常規(guī)規(guī)貼壁細胞操作流程進行消化、終止消化、吹打,并與之前收集的懸浮細胞混懸,分瓶培養(yǎng)。
轉(zhuǎn)化細胞任何售后問題,均需拍照存檔并及時客服。

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