化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
丙酮酰四氫蝶呤合酶檢測(cè)試劑盒?操作步驟
閱讀：195 發(fā)布時(shí)間：2021-11-22丙酮酰四氫蝶呤合酶檢測(cè)試劑盒操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體
雌二醇抗體
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體
轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體
卵巢、胎盤、前列腺、睪丸蛋白22抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體
載脂蛋白C3抗體
細(xì)胞凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體
染色體脆弱性相關(guān)基因抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體
?；o酶A合成酶家族4抗體
酸性磷酸酶樣蛋白2抗體
AHNAK核蛋白2抗體
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體
p53誘導(dǎo)蛋白5抗體
錨蛋白重復(fù)域5抗體
腦鈉通道蛋白2抗體
腦鈉通道蛋白4抗體
小腸鈉通道蛋白5抗體
APXL蛋白抗體
酸敏感離子通道蛋白3抗體
天門冬氨酸β羥化酶抗體
精氨酸加壓素受體2抗體
細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白樣蛋白3抗體
膜粘連蛋白8抗體
水通道蛋白8抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體
凋亡抑制因子5抗體
水通道蛋白-3抗體